[发明专利]一种荧光定量检测方法有效
| 申请号: | 202011566639.8 | 申请日: | 2020-12-25 |
| 公开(公告)号: | CN112683869B | 公开(公告)日: | 2023-03-14 |
| 发明(设计)人: | 潘力;朱海龙;周哲;付威威;尹焕才;刘敏;董月芳;张洋 | 申请(专利权)人: | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
| 主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N21/01 |
| 代理公司: | 北京三聚阳光知识产权代理有限公司 11250 | 代理人: | 张乐乐 |
| 地址: | 215163 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 荧光 定量 检测 方法 | ||
本发明提供一种荧光定量检测方法,包括如下步骤:S1:将装有待测样品的试剂管放置在所述固定架的第一安装腔上;S2:采用加热结构对试剂管加热到预设温度,并使待测样品保持在预设温度;S3:采用光源部件发射出的激发光束经第一通道照射在待测样品上,光探测器经第一通道接收从试剂管内发射出的探测光束。由于光源部件和光探测器均位于固定架的同一侧,光源部件发射出的激发光束经第一通道照射在试剂管内的样品上,之后样品在预设温度下产生探测光束,探测光束相对于激发光束沿反射光路照射在光探测器上,以形成反射式的检测通道,提高检测方法的检测精度,降低出现假阴性的误判。
技术领域
本发明属于生物检测的技术领域,具体涉及一种荧光定量检测方法。
背景技术
目前基于LAMP(环介导恒温扩增技术)的技术检测生物体内是否含有相应的细菌或病毒的方法,通过是首先提取生物体内血液或者分泌液等样本,然后分离出样本中的DNA或RNA,之后将提取的DNA或RNA添加到含有使要检测DNA或RNA快速复制所需的酶、营养液、标定剂等物质的试剂管中,接着将试剂管安放在LAPM检测仪中,通过控制温度,提高DNA或RNA的复制速度,使样本中可能含有的所需检测的DNA或RNA快速复制,便于检测人员通过物理观察或光学探测的检测方法,来判别该生物体内是否含有所需检测的细菌或病毒。
现有的LAMP检测仪,多采用的直射式光路检测方法,即其检测仪包括U型的试管架,分别设在U型试管架两侧光源组件和光光探测器,当需要试剂管内的试剂进行荧检测时,将装有试剂的试剂管放置在U型试管架上,光源组件朝向试管架方向发生出光源,光源照射在试剂管的试剂上,试剂在光照作用下产生荧光,产生的荧光照射在光光探测器上,以对试剂中荧光进行检测。
但是,由于试剂管安装在试管架上,鉴于生产的精度或安装不到位,不可避免地试剂管的外周壁与试管架之间存在间隙,光源组件的部分光源不经过试剂管内的样本试剂而穿过该间隙后,直接进入到光探测器中,从而使光探测器的探测灵敏度较低,导致现有的荧光定量检测方法容易出现漏检或者造成假阴性的误判。
发明内容
为此,本发明所要解决的技术问题现有的荧光定量检测方法的检测精度较低,容易出现假阴性的误判。
因此,本发明提供一种荧光定量检测方法,采用的检测装置包括固定架和至少一个检测机构,固定架上设有至少一个供试剂管安装的第一安装腔,及将第一安装腔与外界连通的第一通道;每个检测机构包括设在所述固定架同一侧且与第一通道连通的的光源部件和光探测器;所述检测方法包括如下步骤:
S1:将装有待测样品的试剂管放置在所述固定架的第一安装腔内;
S2:采用加热结构对试剂管加热到预设温度,并使待测样品保持在预设温度;
S3:采用光源部件发射出的激发光束经第一通道照射在待测样品上,光探测器经第一通道接收从待测样品发射出的探测光束。
可选地,上述的荧光定量检测方法,检测机构还包括反射元件(44)和二向色镜;其中,所述反射元件设在所述光源部件的出光光路上,所述二向色镜设在所述反射元件的反射光路上;所述光探测器设在所述二向色镜的透射光路上;
在S3步骤中,光源部件发射出的激发光束经反射元件、二向色镜后照射在待测样品上;并且待测样品发射出的探测光束经二向色镜透射后,照射在光探测器上。
可选地,上述的荧光定量检测方法,所述检测机构还包括依次设在所述光源部件的发射光路上的第一准直透镜和第一滤光片,所述第一滤光片位于所述第一准直透镜和所述反射元件之间;
在S3步骤中,光源部件发射出的激发光束经第一准直透镜、第一滤光片、反射元件、二向色镜反射后照射在待测样品上。
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