[发明专利]一种固定化菌藻微球及其制备方法

权利要求书

1.一种固定化菌藻微球，其特征在于，所述微球中含有枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、微藻、载体和交联剂；所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC No.12317；所述载体为海藻酸钠和明胶，所述交联剂为氯化钙溶液。

2.根据权利要求1所述的菌藻微球，其中，以微球总质量为基准，所述枯草芽孢杆菌的含量为10⁸-10⁹ CFU/g，所述微藻的含量为1.2-1.5重量%，所述海藻酸钠的含量为3-4重量%，所述明胶的含量为1-1.2重量%，所述氯化钙的含量为0.9-2重量%。

3.根据权利要求1所述的菌藻微球，其中，所述微藻和所述枯草芽孢杆菌的生物量比为1：1.5-2.5。

4.根据权利要求1所述的菌藻微球，其中，所述微藻为小球藻（Chlorella sp.）、羊角月藻（Selenastrum capricornutum）和斜生栅藻（Scendesmus obliquus）中的至少一种。

5.权利要求1所述的固定化菌藻微球的制备方法，其中，所述制备方法包括以下步骤：

S1、将枯草芽孢杆菌接种到愈创木酚固体培养基中，平板培养后转入LB固体培养基中进行恒温震荡培养至对数期，得到菌液，所述枯草芽孢杆菌的保藏编号为CGMCC No.12317；

S2、将微藻接种至TAP培养基中培养至对数期，得到微藻培养液；

S3、将海藻酸钠、明胶和水混合，得到载体溶液；

S4、将所述菌液和所述微藻培养液混合均匀，得到混合菌藻溶液；将混合菌藻溶液加入到所述载体溶液中，混合均匀后滴定至氯化钙溶液中进行交联，然后进行清洗，得到固定化菌藻微球。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其中，所述菌液的浓度为1.0×10⁸-1.0×10⁹ CFU/mL；所述微藻培养液的浓度为6.0×10⁷-8.0×10⁷ CFU/mL；所述载体溶液中海藻酸钠的浓度为0.03-0.05 g/mL，所述明胶的浓度为0.01-0.012 g/mL；所述氯化钙溶液的浓度为0.009-0.02 g/mL。

7.根据权利要求5所述的制备方法，其中，所述愈创木酚固体培养基，其成分包括：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、CuSO₄、愈创木酚和琼脂；所述LB固体培养基，其成分包括：胰蛋白胨、酵母粉、NaCl和琼脂；所述TAP培养基，其成分包括：H₂NC(CH₂OH)₃、NH₄Cl、MgSO₄、CaCl₂、K₂HPO₄、KH₂PO₄、Na₂EDTA、ZnSO₄、H₃BO₃、MnCl₂、FeSO₄、CoCl₂、CuSO₄、(NH₄)₆Mo₇O₂₄和CH₃COOH。