[发明专利]一株棘孢曲霉及其在抗根结线虫中的应用

说明书

本发明公开了一株棘孢曲霉及其在抗根结线虫中的应用。本发明提供了棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)HH5‑7，保藏登记号为CGMCC No.21033。本发明还保护一种制备棘孢曲霉HH5‑7的提取物的方法，包括如下步骤：取棘孢曲霉HH5‑7的发酵物，采用有机试剂进行提取，收集提取液；将提取液进行减压蒸馏以去除有机溶剂和水，得到提取物。本发明还保护棘孢曲霉HH5‑7或所述提取物的应用，为如下(a)或(b)：(a)在制备线虫抑制剂中的应用；(b)在抑制线虫中的应用。本发明还保护棘孢曲霉HH5‑7或所述提取物在制备式(Ⅰ)所示化合物中的应用。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一株棘孢曲霉及其在抗根结线虫中的应用。

背景技术

根结线虫是农业上一种非常严重的寄生虫，是农作物种植中的重要病害之一。每年给农业造成了非常严重的经济损失。

根结线虫寄主很广，可危害39科130多种作物。线虫体型很小，肉眼很难看到。多分布在0-20厘米土壤内，特别是3-9厘米土壤中线虫数量最多。雌雄异体，雌成虫圆梨形，雄成虫线状，常以卵或二龄幼虫随植株残体遗留在土壤中或粪肥中越冬或翌年环境适宜时以二龄幼虫从嫩根侵入，繁殖危害。线虫可通过带虫土或苗及灌溉水传播。土温25℃-30℃，土壤湿度为40％-70％条件下线虫繁殖很快，10℃以下停止活动，55℃时10分钟死亡。在无寄主条件下可存活1年。

由于药物的广泛使用，根结线虫随之发生了耐药现象，因此需要筛选新的药物，用于农业线虫防治。

发明内容

本发明的目的是提供一株棘孢曲霉及其在抗根结线虫中的应用。

本发明提供了棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)HH5-7，已于2020年12月02日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏登记号为CGMCC No.21033。

本发明还提供了一种制备棘孢曲霉HH5-7的发酵物的方法，包括如下步骤：将棘孢曲霉HH5-7进行发酵，得到发酵物。所述发酵采用的培养基为发酵培养基。

发酵培养基的原料组成如下：1-2质量份大米和1-2质量份水。发酵培养基的制备方法如下：1-2质量份大米和1-2质量份水混合，浸泡。发酵培养基的制备方法具体如下：200g大米和200g水混合，室温浸泡12小时。

制备棘孢曲霉HH5-7的发酵物的方法具体如下：

(1)取棘孢曲霉HH5-7，接种于PDA培养基平板上，28℃静置培养3-5天；

(2)完成步骤(1)后，用无菌水冲洗所述平板，收集孢子，每个平板约得到50-60ml孢子液；

(3)将步骤(2)得到的孢子液接种至装有发酵培养基的三角瓶中(每个三角瓶接种10ml孢子液)，20-35℃静置培养14-35天(具体可为：28℃静置培养28天)。

完成步骤(3)后，三角瓶中的内容物即发酵物。

三角瓶规格为1000mL。

每个三角瓶中的发酵培养基如下：将200g大米和200g水混合，室温浸泡12小时。

所述PDA培养基平板的直径为9cm。

所述方法制备得到的发酵物也属于本发明的保护范围。

本发明还保护一种制备棘孢曲霉HH5-7的提取物的方法，包括如下步骤：

取所述发酵物，采用有机试剂进行提取，收集提取液；

将所述提取液进行减压蒸馏以去除有机溶剂和水，得到提取物。