[发明专利]一种用于测量钙离子的试剂盒及其使用方法

说明书

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种用于测量钙离子的试剂盒及其使用方法。本发明主要涉及一种含有如下式I所示化合物的用于测量钙离子的试剂盒及其使用方法。所述试剂盒稳定性好、精密度高、线性范围广、不受镁干扰、且不含环境不友好的砷元素，可以应用于生化及临床医药领域。

技术领域

本发明属于分析检测技术领域，具体涉及一种用于测量钙离子的试剂盒及其使用方法。

背景技术

血清总钙量是常用的临床生化检验指标，具有重要的临床意义。

钙是人体内含量最多的阳离子，参考范围非常窄(2.08-2.70mmol/L)，医学决定水平浓度分别是1.75mmol/L、2.75mmol/L和3.38mmol/L。在这些水平之上或之下的轻微偏离对数种生理障碍具有诊断意义。血清钙升高常见于甲状旁腺功能亢进、多发性骨髓瘤、结节病、大量应用维生素D治疗引起的肠道过量吸收。血清钙水平降低一般与甲状旁腺功能减退、慢性肾衰竭等相关。

血清总钙测定方法主要有火焰光度法、原子吸收分光光度法、放射性核素稀释质谱法、滴定法和比色法，其中决定性方法为放射性核素稀释质谱法，参考方法为原子吸收分光光度法。火焰光度法、原子吸收分光光度法和放射性核素稀释质谱法虽然结果准确，干扰因素少，但设备复杂，费用昂贵，不适合常规实验和自动分析。

在临床检验中常用的测量钙的方法是比色法，有邻甲酚酞络合酮(OCPC)法、偶氮砷III法、甲基麝香草酚蓝法和NM-BAPTA法。虽然这些方法目前市面都在使用，但是每种方法都有缺点。

OCPC法虽然是WHO和我国卫生部临床检验中心(1997年)推荐的常规方法，但是该方法存在选择性差(也会结合镁)、稳定性差(过分依赖于强碱环境)、线性不通过“零点”等严重缺点。

偶氮砷III法是近几年发展起来的方法，该方法消除了OCPC法的许多缺点，具有试剂稳定、本底吸光度低、无强碱、不怕镁干扰等优点，但是该方法存在试剂间化学污染、灵敏度低和环境污染等问题。

甲基麝香草酚蓝比色法测定血清钙具有快速、简便、结果准确的特点，适用于临床生化检验，缺点是由于试剂碱性较强、试剂本身的稳定性不甚理想。

NM-BAPTA法存在显色剂硝化的产率低的缺点。而且，NM-BAPTA法专一性地与罗氏销售的相关设备配套使用，因而该方法具有价格高、适用设备机型少并且不利于临床应用推广等缺点。

综上所述，开发出稳定性好、精密度高、线性范围广、不受镁干扰、不含砷元素、能应用于临床、全自动检测、适用范围广泛的钙检测试剂是目前亟待解决的问题。

发明内容

本发明目的在于提供新的钙检测试剂，以改进或消除现有技术中的钙检测试剂的缺陷。

发明人发现双硝基取代的BAPTA型螯合剂在此方面表现出非常好的性质，非常适合检测钙离子。

本发明首先提供如下式I的化合物，

其中，R₁、R₄相同或不同，彼此独立地选自氢、卤素、羧基、C_1-6烷基和甲酰基；

R₂、R₃、R₅和R₆相同或不同，彼此独立地选自氢、卤素、C_1-6烷基或C_1-6烷氧基；

X⁺为带正电荷的抗衡离子。

根据本发明的实施方案，R₁、R₄相同或不同，彼此独立地选自氢、卤素、羧基、C_1-3烷基和甲酰基；