[发明专利]基于GC-MS技术-同位素内标法测定汉麻中CBD、THC和CBN含量的方法

说明书

本发明涉及建立一种基于GC/MS技术‑同位素内标法同时测定汉麻中CBD、THC和CBN三个有效成分含量方法，并探讨其化学表型；其用甲醇提取样品中目标成分，经超声提取以及离心后制备样品溶液；利用气相色谱‑质谱联用仪（GC/MS），选定合理的色谱、质谱条件运用同位素内标法建立测定汉麻中四氢大麻酚（THC）、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)三种成分含量的定性、定量分析方法。结果显示：通过一些方法学考察得出该方法专属性较好，准确性较高，灵敏度较高。在选定的浓度范围内线性关系良好，线性范围较宽，稳定性好，精密度较高。

技术领域

本发明属于汉麻中CBD、THC和CBN含量测定技术领域，具体涉及一种基于GC-MS技术-同位素内标法测定汉麻中CBD、THC和CBN含量的方法。

背景技术

汉麻，即工业大麻(Cannabis sativa L)，为大麻科大麻属的一年生草本植物，又名火麻、云麻等，是指植物中四氢大麻酚(Tetrahydrocannabinol,THC)含量低于0.3％的非毒品性大麻类型。我国具有几千年的种植和使用麻原料的历史，其应用涉及医药、食品、保健品和化妆品等多个领域。现代药理研究表明：大麻具有镇痛、降眼压、抗肿瘤、抗呕吐、抗血栓、抗菌抗炎等生物活性。汉麻化学成分极其复杂，有效成分主要可分为大麻素类与非大麻素类两大类物质，其中大麻素(Cannabinoids)是大麻植物中特有的含有烷基和单萜基团分子结构的一类次生代谢产物。目前，已从大麻干物质及新鲜大麻叶中分离出大麻素类化合物100多种，主要包括THC、大麻二酚(Cannabidiol，CBD)、大麻酚(Cannabinol，CBN)、大麻环萜酚(Cannabichromene,CBC)、大麻萜酚(Cannabigerol,CBG)及其丙基同系物等，其中以THC、CBD和CBN的含量最高。同时，汉麻中还含有非大麻素类化合物，诸如黄酮及其苷类、生物碱类、香豆素类、多酚类、多糖类、甾醇类、脂肪酸类、菲类化合物等。

目前，常用的检测大麻素类化合物的方法主要有TLC法，GC法，HPLC法，还有些检测方法特别是新兴起的GC-MS和LC-MS方法主要应用在大麻吸食者和试验动物的血液、尿液、组织等生物制品中。薄层色谱法手续繁琐，分析时间长，容易出现假阳性结果；GC和HPLC法的灵敏度较低，而大麻植株中不同部位大麻素类物质含量可能较低，对灵敏度要求较高；GC-MS技术是目前国内外公认的法庭科学分析方法，常用的EI源具有较强的选择性、专一性、准确性及较高的灵敏度，能够对大麻植株及大麻类毒品的各个成分进行有效的定性、定量检测。大麻有关行标检测方法(GAT 1008.3-2013公共安全行标常见毒品的检验方法第三部分大麻)采用GC-FID技术，用外标法和内标法(选择三苄胺作内标)两种定量方式测定THC的含量，同时又采用GC-MS技术定性筛查确证THC、CBD和CBN三个成分；但是该方法仍存在检出限低、灵敏度低、专属性差等缺点。

基于此，本申请提供了一种基于GC/MS技术-同位素内标(THC-D₃)进行内标法同时定性定量检测THC、CBD和CBN三个成分含量的方法，且待测物的氘代同位素与待测物分子性质极为一致，与待测物在前处理过程中、色谱分离过程中及离子化过程中具有完全相同的遭遇，而质谱又可以将同位素分开，从而可以极大的消除基质效应的干扰，更有效的校正分析方法过程中产生的误差，使得定量定性更加准确可靠。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术缺陷，提供一种基于GC-MS技术-同位素内标法测定汉麻中CBD、THC和CBN含量的方法，该方法具有操作更加简便易行、结果准确可靠、灵敏高效、易普及等优点。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种基于GC-MS技术-同位素内标法测定汉麻中CBD、THC和CBN含量的方法，其包括如下步骤：

1)含内标的系列混合标准工作溶液的制备：