[发明专利]一种抗氧化剂在动物卵母细胞体外成熟中的应用

说明书

本发明公开了一种抗氧化剂在动物卵母细胞体外成熟中的应用。本发明提供的改进动物卵母细胞体外成熟的方法，包括：在动物卵母细胞体外成熟液中添加艾地苯醌。本发明还提供了一种艾地苯醌在改进动物卵母细胞体外成熟中的应用。具体的，所述艾地苯醌在所述动物卵母细胞体外成熟液中的浓度为10‑30μM；更具体可为20μM。该方法优化了卵母细胞体外培养条件，提高其胚胎发育能力。该方法简单易行，材料来源方便，具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于胚胎工程领域，涉及一种抗氧化剂在动物卵母细胞体外成熟中的应用。

背景技术

动物胚胎体外生产技术是将哺乳动物卵母细胞从卵巢卵泡中采集后,于培养液中进行卵母细胞体外成熟、体外受精、胚胎体外培养等一系列技术过程，现已日趋成熟且成为一项重要的动物繁殖生物技术。该技术一般用于纯繁扩群，增加种畜的数量；缩短家畜的育种周期，加速品种改良；移植产双胎，提高生产效率；保存优良品种资源等方面。因此，该技术是一项极具应用价值的快速繁育技术。

然而，无论是激素超排所得还是从屠宰场获得的卵母细胞发育能力都明显低于体内成熟的卵母细胞。这些卵子的质量层次不齐，导致无法获得较为稳定的胚胎来源，这是目前该技术的主要缺陷。如果能够提高卵母细胞的体外发育能力，就会进一步提升该技术的总体效率，提高这一技术的生产应用水平。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗氧化剂在动物卵母细胞体外成熟中的应用。

本发明提供的改进动物卵母细胞体外成熟的方法，包括：

在动物卵母细胞体外成熟液中添加艾地苯醌。

本发明还提供了一种艾地苯醌在改进动物卵母细胞体外成熟中的应用。

具体的，所述艾地苯醌在所述动物卵母细胞体外成熟液中的浓度为10-30μM。

更具体的，所述艾地苯醌在所述动物卵母细胞体外成熟液中的浓度为20μM。

所述动物卵母细胞体外成熟液的组成如下：

TCM199+20％羊血清+10μg/mL FSH+10μg/mL LH+1μg/mL 17β-estradiol+100IU/mL penicillin+100μg/mL streptomycin；

所述动物卵母细胞体外成熟液中，FSH代表卵泡刺激素(Follicle-StimulatingHormone)；

LH代表黄体生成素(Luteinizing Hormone)；

17β-estradiol代表17β-雌二醇；

penicillin代表青霉素；

streptomycin代表链霉素；

所述羊血清可按照如下方法获得：从发情母羊静脉采血，4℃静置过夜，3000rmp离心30min，收集血清，冷冻保存备用；

所述浓度均是指在所述动物卵母细胞体外成熟液中的最终浓度。

体外胚胎发育能力低的主要原因是卵子成熟度不够，导致受精后发育潜力不足。在体内条件下,输卵管和子宫环境中的氧气浓度(2–8％)低于通常用于体外胚胎培养的氧气浓度(大约20％),与体内成熟相比,体外培养条件下大气中氧的浓度对卵母细胞产生毒性作用。体外成熟期间的活性氧(ROS)产量增加引起氧平衡失调,产生卵母细胞减数分裂成熟抑制和胚胎发育阻滞等负作用。本发明提供了一种改进动物卵母细胞体外成熟的方法，通过在体外成熟液中添加抗氧化剂艾地苯醌来提高动物卵母细胞的发育能力，该方法优化了卵母细胞体外培养条件，提高其胚胎发育能力。该方法简单易行，材料来源方便，具有重要的应用价值。

具体实施方式