[发明专利]一种从微生物发酵液中分离纯化母乳低聚糖的方法及其应用

权利要求书

1.一种从微生物发酵液中分离纯化母乳低聚糖的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S10、将含有母乳低聚糖的微生物发酵液进行离心，分别收集上清液和下层的菌体；

S20、将所述菌体重悬，并加入溶菌酶反应，再进行超声处理，使所述菌体破壁，过滤，得到滤液A；

S30、将所述滤液A与所述上清液混合，得到混合液，将所述混合液浓缩醇沉，抽滤，再将抽滤得到的产物旋蒸，最后加水复溶，得到溶液B；

S40、将所述溶液B用活性炭处理后，再用阳离子交换剂处理，得到溶液C；

S50、将所述溶液C纳滤浓缩，得到浓缩液，将所述浓缩液进行喷雾干燥，即可得到母乳低聚糖。

2.如权利要求1所述的从微生物发酵液中分离纯化母乳低聚糖的方法，其特征在于，步骤S10中，所述微生物发酵液包括重组大肠杆菌发酵液，其中，所述重组大肠杆菌发酵可合成母乳低聚糖。

3.如权利要求1所述的从微生物发酵液中分离纯化母乳低聚糖的方法，其特征在于，步骤S10中，所述离心的转速为4000～8000rpm，离心时间为10～15min。

4.如权利要求1所述的从微生物发酵液中分离纯化母乳低聚糖的方法，其特征在于，步骤S20包括：

将所述菌体用磷酸缓冲液重悬，并加入溶菌酶在25～30℃下反应15～20min，再进行超声处理，使所述菌体破壁，得到溶液A。

5.如权利要求4所述的从微生物发酵液中分离纯化母乳低聚糖的方法，其特征在于，所述磷酸缓冲液的pH值为6.2～7.0；和/或，

所述溶菌酶的浓度为0.1～0.2mg/mL。

6.如权利要求1所述的从微生物发酵液中分离纯化母乳低聚糖的方法，其特征在于，所述超声处理的条件为：功率为100～200W，处理时间为5～10min。

7.如权利要求1所述的从微生物发酵液中分离纯化母乳低聚糖的方法，其特征在于，步骤S30中，所述浓缩醇沉步骤包括：

将所述混合液真空浓缩至体积的1/3，再加入乙醇，得到混合溶液，并使所述混合溶液中所述乙醇的体积浓度为70～80％，将所述混合溶液静置12～24h。

8.如权利要求1所述的从微生物发酵液中分离纯化母乳低聚糖的方法，其特征在于，步骤S50中，所述纳滤浓缩的步骤中：

所述纳滤浓缩的纳滤膜的材质包括醋酸纤维素、磺化聚砜、磺化聚醚砜和聚乙烯醇中的任意一种；和/或，

所述纳滤浓缩的纳滤膜的截留分子量为80～1000。

9.如权利要求1所述的从微生物发酵液中分离纯化母乳低聚糖的方法，其特征在于，步骤S50中，所述喷雾干燥的条件为：

所述喷雾干燥的喷嘴温度为100～150℃；和/或，

所述喷雾干燥的出口温度为50～80℃。

10.一种婴幼儿奶粉，其特征在于，包括母乳低聚糖，所述母乳低聚糖是从微生物发酵液中分离纯化获得的，所述分离纯化方法为如权利要求1至9任意一项所述的从微生物发酵液中分离纯化母乳低聚糖的方法。