[发明专利]一种利用荧光显微镜观察植物叶表皮毛被的方法有效
申请号: | 202011514828.0 | 申请日: | 2020-12-21 |
公开(公告)号: | CN112525876B | 公开(公告)日: | 2022-11-01 |
发明(设计)人: | 刘孟奇;罗晓;刘春朝;练从龙;王海春;徐璐;陈随清 | 申请(专利权)人: | 河南中医药大学 |
主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N1/28 |
代理公司: | 郑州天阳专利事务所(普通合伙) 41113 | 代理人: | 聂孟民 |
地址: | 450046 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 荧光显微镜 观察 植物 表皮 方法 | ||
1.一种利用荧光显微镜观察艾、野菊植物叶表皮毛被的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)、剪取叶片:从植株上剪下成熟的叶片,在叶片中脉中段两侧剪取无粗叶脉的5-10mm2叶片;
(2)、甲醇固定:将剪取的叶片,置于甲醇中固定3—6h;
(3)、乙醇处理:将叶片转移至体积浓度95%的乙醇中浸泡6—12h,以除去叶绿素;
(4)、小檗碱处理:从体积浓度95%的乙醇中取出处理好的叶片,在体积浓度0.1%—0.5%的小檗碱中浸泡5—15min;
(5)、香草醛-浓盐酸处理:将叶片从小檗碱中取出,转移至香草醛-浓盐酸液中处理1—5min;所述的香草醛-浓盐酸液是,香草醛1-5g加浓盐酸至100mL制成,浓盐酸质量浓度为36%—38%;
(6)、漂洗:将叶片从香草醛-浓盐酸液中取出,用水漂洗1—2min;
(7)、封片:将漂洗好的叶片转移至载玻片上,盖上盖玻片,轻轻压平,用落射荧光显微镜观察腺毛和非腺毛的类型和分布,并摄像。
2.根据权利要求1所述的利用荧光显微镜观察艾、野菊植物叶表皮毛被的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)、剪取叶片:从植株上剪下成熟的叶片,在叶片中脉中段两侧剪取无粗叶脉的8mm2叶片;
(2)、甲醇固定:将剪取的叶片,室温置于甲醇中固定4h;
(3)、乙醇处理:用镊子将叶片转移至体积浓度95%的乙醇中室温浸泡9h,以除去叶绿素;
(4)、小檗碱处理:用镊子从体积浓度95%的乙醇中取出处理好的叶片,在体积浓度0.3%的小檗碱中室温浸泡10min;
(5)、香草醛-浓盐酸处理:用镊子将叶片从小檗碱中取出,转移至香草醛-浓盐酸液中室温处理3min;所述的香草醛-浓盐酸液是,香草醛3g加浓盐酸至100mL制成,浓盐酸质量浓度为37%;
(6)、漂洗:用镊子将叶片从香草醛-浓盐酸液中取出,用水漂洗2min;
(7)、封片:用镊子将漂洗好的叶片转移至载玻片上,盖上盖玻片,轻轻压平,用落射荧光显微镜观察腺毛和非腺毛的类型和分布,并摄像。
3.根据权利要求1所述的利用荧光显微镜观察艾、野菊植物叶表皮毛被的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)、剪取叶片:从植株上剪下成熟的叶片,在叶片中脉中段两侧剪取无粗叶脉的6mm2叶片;
(2)、甲醇固定:将剪取的叶片,室温置于甲醇中固定5h;
(3)、乙醇处理:用镊子将叶片转移至体积浓度95%的乙醇中室温浸泡7h,以除去叶绿素;
(4)、小檗碱处理:用镊子从体积浓度95%的乙醇中取出处理好的叶片,在体积浓度0.4%的小檗碱中室温浸泡6min;
(5)、香草醛-浓盐酸处理:用镊子将叶片从小檗碱中取出,转移至香草醛-浓盐酸液中室温处理4min,所述的香草醛-浓盐酸液是,香草醛2g加浓盐酸至100mL制成,浓盐酸质量浓度为38%;
(6)、漂洗:用镊子将叶片从香草醛-浓盐酸液中取出,用水漂洗2min;
(7)、封片:用镊子将漂洗好的叶片转移至载玻片上,盖上盖玻片,轻轻压平,用落射荧光显微镜观察腺毛和非腺毛的类型和分布,并摄像。
4.根据权利要求1所述的利用荧光显微镜观察艾、野菊植物叶表皮毛被的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)、剪取叶片:从植株上剪下成熟的叶片,在叶片中脉中段两侧剪取无粗叶脉的9mm2叶片;
(2)、甲醇固定:将剪取的叶片,室温置于甲醇中固定3.5h;
(3)、乙醇处理:用镊子将叶片转移至体积浓度95%的乙醇中室温浸泡11h,以除去叶绿素;
(4)、小檗碱处理:用镊子从体积浓度95%的乙醇中取出处理好的叶片,在体积浓度0.2%的小檗碱中室温浸泡14min;
(5)、香草醛-浓盐酸处理:用镊子将叶片从小檗碱中取出,转移至香草醛-浓盐酸液中室温处理2min;所述的香草醛-浓盐酸液是,香草醛4g加浓盐酸至100mL制成,浓盐酸质量浓度为36%;
(6)、漂洗:用镊子将叶片从香草醛-浓盐酸液中取出,用水漂洗1min;
(7)、封片:用镊子将漂洗好的叶片转移至载玻片上,盖上盖玻片,轻轻压平,用落射荧光显微镜观察腺毛和非腺毛的类型和分布,并摄像。
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