[发明专利]一种酶解多肽及用于制备抗白血病的药物的用途

说明书

本发明公开了一种酶解多肽及用于制备抗白血病的药物的用途，该酶解多肽由如下方法制备：先使用碱提酸沉法从北五味子的干燥成熟果实中提取五味子总蛋白，再使用碱性蛋白酶对五味子总蛋白进行酶解，最后使用超滤分离收集分子量介于5000u和7000u间的五味子酶解多肽。本发明提供的五味子酶解多肽对急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞均具有明显的抑制活性，可以用于制备抗急性淋巴细胞白血病的药物。

技术领域

本发明属于多肽领域，涉及酶解多肽及应用，具体涉及一种酶解多肽及用于制备抗白血病的药物的用途。

背景技术

急性淋巴细胞白血病属于侵袭性血液系统恶性肿瘤，约占儿童期白血病的75％，在成人中也较为常见。其特征是T系祖细胞异常克隆性增殖，导致白血病淋巴母细胞在骨髓和各种髓外部位积聚，从而引起贫血、发热、肝脾肿大、关节疼痛以及全身淋巴结肿大等临床症状。急性淋巴细胞白血病发病率逐年上升，严重威胁人们生命健康。寻找开发有效的化疗药物是攻克急性淋巴细胞白血病的重要途径。

五味子为木兰科五味子属多年生木质藤本植物，其成熟果实干燥后作药用，因其果实甘、酸、辛、苦、咸五味俱全，故名五味子，主产于东北地区，故习称“北五味子”。

目前，五味子的研究主要集中于五味子中的小分子化合物，对其所含多肽的研究极少。

发明内容

本发明的目的在于提供一种酶解多肽及用于制备抗白血病的药物的用途。

实现本发明上述目的技术方案如下：

一种酶解多肽，由如下方法制备：先使用碱提酸沉法从北五味子的干燥成熟果实中提取五味子总蛋白，再使用碱性蛋白酶对五味子总蛋白进行酶解，最后使用超滤分离收集分子量介于5000u和7000u间的五味子酶解多肽。

进一步地，碱提酸沉方法为：取北五味子的干燥成熟果实先用无水乙醇热回流提取，过滤挥干残留溶剂；加纯净水，调节pH至10.5，常温搅拌提取；提取液先过滤收集滤液，离心，取上清液，调节pH至4.5，静置，离心，收集沉淀，冷冻干燥，得到五味子总蛋白。

进一步地，酶解参数为：pH值，8.0；酶解温度，50℃；酶解时间，8h；酶添加量，2500U/g。

进一步地，超滤步骤中依次使用截留分子量为7000u和5000u的超滤膜进行超滤，收集分子量介于5000u和7000u之间的组分，冷冻干燥。

上述酶解多肽在制备治疗急性淋巴细胞白血病的药物方面的应用。

本发明的突出优点：

本发明提供了一种五味子酶解多肽，活性研究表明该多肽对急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞均具有明显的抑制活性，可以用于制备抗急性淋巴细胞白血病的药物。

附图说明

图1为扫描电子显微镜下观察五味子酶解多肽的形貌；

图2为Westernblotting图。

具体实施方式

下面就结合实施例具体介绍本发明的实质性内容，由于篇幅原因，实验过程的描述无法做到非常详细，凡是实验中未详细描述的部分均为本领域技术人员熟知的常规操作。

实施例1

一、实验材料

将北五味子的干燥成熟果实粉碎过60目筛，备用。

纯净水为娃哈哈桶装纯净水；碱性蛋白酶购自诺维信。

二、实验方法

步骤S1：碱提酸沉提取总蛋白