[发明专利]一种腺苷的发酵菌株及其制备工艺优化在审
| 申请号: | 202011485511.9 | 申请日: | 2020-12-16 |
| 公开(公告)号: | CN112481334A | 公开(公告)日: | 2021-03-12 |
| 发明(设计)人: | 陈本顺;李大伟;石利平;徐春涛;刘轩豪;马骧;钱若灿;许鹏;何义;刘思琪;朱萍;施莉莉 | 申请(专利权)人: | 江苏阿尔法药业有限公司 |
| 主分类号: | C12P19/40 | 分类号: | C12P19/40;C12N1/20;C12R1/125 |
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| 地址: | 223800 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 腺苷 发酵 菌株 及其 制备 工艺 优化 | ||
1.一种腺苷的发酵制备工艺,其特征在于,所述的腺苷由高产菌株Bacillussubtilis-117发酵制备;发酵制备工艺包括如下步骤:(1)细胞先在种子培养基培养后,转接发酵培养基,发酵培养,诱导细胞合成腺苷;(2)发酵制备完成后,用大孔吸附树脂进行吸附,吸附腺苷;(3)大孔吸附树脂用除杂洗脱剂进行洗脱,再用洗脱腺苷溶剂进行洗脱,收集含腺苷的洗脱腺苷溶剂;(4)洗脱腺苷溶剂进行浓缩;(5)加入活性炭,升温脱色;(6)将脱色液继续进行浓缩,后降温结晶,分离提纯,得到腺苷成品。
2.根据权利要求1所述的腺苷的发酵制备工艺,其特征在于:所述的发酵培养所用的种子培养基配方为:葡萄糖15g/L,酵母浸粉6g/L,胰蛋白胨12g/L,氯化钠12g/L。
3.根据权利要求1所述的腺苷的发酵制备工艺,其特征在于:所述的发酵培养所用的发酵培养基配方为:蔗糖50g/L,硫酸铵6g/L,酵母膏8g/L,谷氨酸钠5g/L,七水硫酸镁3g/L,磷酸二氢钾1g/L,一水硫酸锰100mg/L,七水硫酸亚铁50mg/L,豆油10mL/L,SP850大孔吸附树脂20g/L,pH为6.8。
4.根据权利要求1所述的腺苷的发酵制备工艺,其特征在于:所述的大孔吸附树脂为SP850型大孔吸附树脂,将大孔吸附树脂添加在培养基中,在发酵过程中,边合成边吸附。
5.根据权利要求1所述的腺苷的发酵制备工艺,其特征在于:所述的除杂洗脱剂为5%~20%的乙醇溶液,洗脱体积为2~3倍的大孔吸附树脂体积。
6.根据权利要求1所述的腺苷的发酵制备工艺,其特征在于:所述的洗脱腺苷溶剂为40%~70%乙醇,洗脱体积为3~5倍的大孔吸附树脂体积。
7.根据权利要求1所述的腺苷的发酵制备工艺,其特征在于:所述的浓缩工艺为真空旋蒸浓缩,真空压力为-0.08MPa~-0.1MPa,旋蒸温度为60~80℃。
8.根据权利要求1所述的腺苷的发酵制备工艺,其特征在于:所述的活性炭的量为浓缩液质量的1%~2%,脱色温度70~80℃,脱色时间15~30min。
9.根据权利要求1所述的腺苷的发酵制备工艺,其特征在于:所述的结晶分离工艺为将脱色液继续浓缩至腺苷含量100g/L~150g/L,温度降至0~5℃,保冷4~6h,使得腺苷结晶析出,然后过滤分离,得到腺苷成品。
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