[发明专利]用于超顺磁微粒及其蛋白连接物保存的缓冲液及制备方法有效
申请号: | 202011479499.0 | 申请日: | 2020-12-15 |
公开(公告)号: | CN112710824B | 公开(公告)日: | 2021-09-28 |
发明(设计)人: | 王法龙;孙家;刘聪;李博飞 | 申请(专利权)人: | 北京美联泰科生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/531 | 分类号: | G01N33/531;G01N33/543 |
代理公司: | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人: | 宋秀兰 |
地址: | 100176 北京市大兴区北京经*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 超顺磁 微粒 及其 蛋白 接物 保存 缓冲液 制备 方法 | ||
本发明属于蛋白保存技术领域,具体涉及一种用于超顺磁微粒及其蛋白连接物保存的缓冲液及制备方法。所述用于超顺磁微粒及其蛋白连接物保存的缓冲液,包括以下组分:十二水合磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠、牛血清白蛋白、蔗糖、黄原胶、海藻酸钠、明胶。本发明提供的缓冲剂可以使微米级超顺磁性微粒及超顺磁微粒与特定蛋白质的连接物进行长时间的存储,使其不会因物理作用(如沉降、板结)而失效;是一种特殊的缓冲液,用于超顺磁微粒及其蛋白连接物的长期保存。
技术领域
本发明属于蛋白保存技术领域,具体涉及一种用于超顺磁微粒及其蛋白连接物保存的缓冲液及制备方法。
背景技术
磁微粒化学发光法是一种先进的免疫学检测方法,可以对血液中的特定蛋白质成分进行体外检测。该方法可以有效辅助医生对患者的病情进行辅助诊断。微米级超顺磁性微粒的蛋白连接物在该方法学中具有重要作用。
然而,超顺磁微粒的蛋白连接物非常容易沉降且因亲水性较差,在沉降后后会逐渐板结为片状或块状结构。板结后的磁微粒-蛋白连接物非常不稳定,会造成反应体系整体失效,导致产品失效。目前,解决板结问题的主要方法有以下几种方法。
一是修饰磁微粒表面结构,增加亲水性。该方法可以有效改善磁微粒的板结现象。但会影响反应体系的整体性能且工艺较复杂、生产成本增加较多。性价比不高。
二是改变缓冲液离子强度浓度,增强反应过程的清洗力度。该方法使用纯物理方式,打碎板结的结构,效果一般。对于全自动设备来说,实现较困难(主要是时间因素),较高的离子浓度在清洗不完全的条件下会对试剂盒性能造成极大影响。
三是改善缓冲液组分,使板结的磁微粒之间变得更加松散,更容易混匀。该方法是一种常用方法,效果较好。但对于具有特殊形状的反应耗材来说(如V字底反应杯)这种方法不易对磁微粒进行混匀,会造成较大的重复性偏差。
因此,研究一种能够长时间储存超顺磁微粒与特定蛋白质的连接物的保存缓冲液,使其不会因物理作用而失效,具有重要的意义。
发明内容
为克服以上技术问题,本发明提供了一种用于超顺磁微粒及其蛋白连接物保存的缓冲液及制备方法。本发明制备的缓冲剂可以使微米级超顺磁性微粒及超顺磁微粒与特定蛋白质的连接物进行长时间的存储,具有较好的保存效果。
为实现以上目的,本发明提供的技术方案如下:
一种用于超顺磁微粒及其蛋白连接物保存的缓冲液,包括以下组分:
十二水合磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氯化钠、牛血清白蛋白、蔗糖、黄原胶、海藻酸钠和明胶。
优选地,按照重量份数计,所述缓冲液,包括以下组分:
十二水合磷酸氢二钠4-8份、磷酸二氢钠0.5-1份、氯化钠5-10份、牛血清白蛋白1-50份、蔗糖60-150份、黄原胶0.1-5份、海藻酸钠0.1-5份、明胶1-15份。
优选地,按照重量份数计,所述缓冲液,包括以下组分:
十二水合磷酸氢二钠5.6-5.9份、磷酸二氢钠0.55-0.60份、氯化钠5-9份、牛血清白蛋白1-10份、蔗糖70-135份、黄原胶0.2-2份、海藻酸钠0.5-5份、明胶5-15份。
优选地,所述黄原胶和明胶的质量比为1:10-1:50;海藻酸钠和明胶的质量比为1:10-1:30。
优选地,所述缓冲液中还包括乳化剂。
优选地,所述乳化剂为吐温-20、吐温-60或吐温-80。
优选地,所述乳化剂的体积占缓冲液总体积的0.1-0.3%。
本发明的另一目的在于提供所述用于超顺磁微粒及其蛋白连接物保存的缓冲液的制备方法,包括以下步骤:
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