[发明专利]一种非疾病诊断的检测PD-L1的免疫传感器系统

权利要求书

1.一种非疾病诊断的检测PD-L1的免疫传感器系统，其特征在于，包括二胺类客体分子、pSC₄-AuNPs、附着有pSC₄的芯片、PD-L1抗体和Homing ‍Peptide功能化的磁包银纳米颗粒，

其中，所述二胺类客体分子与pSC₄-AuNPs结合后在所述附着有pSC₄的芯片表面自组装构筑作为增敏层的三维有序纳米结构3D-AuNPs，所述PD-L1抗体吸附在所述增敏层上，所述Homing ‍Peptide功能化的磁包银纳米颗粒被设置为经过与分析物反应后添加到所述附着有pSC4的芯片表面从而与所述PD-L1抗体进行特异性识别；

其中，所述Homing ‍Peptide功能化的磁包银纳米颗粒的制备方法如下：

(1)将1mL磁包银纳米颗粒溶液用PBS洗三次后，加入特异性的10μL ‍1mg/mL ‍Homing‍Peptide，所述磁包银纳米颗粒与特异性的Homing ‍Peptide的体积比为2:1，反应时间4小时，

(2)磁分离，弃上清，重悬于PBS中，即得到Homing ‍Peptide功能化的磁包银纳米颗粒；

其中，所述3D-AuNPs的制备方法为将100μL的2mM二胺类客体分子与400μL的pSC₄-AuNPs反应10分钟。

2.一种制备如权利要求1所述的非疾病诊断的检测PD-L1的免疫传感器系统的方法，其特征在于，包括如下步骤：(a)将3D-AuNPs添加到附着有pSC₄的芯片表面上，

(b)在多参数表面等离子体共振仪上采用2μL/min的流速添加500μL的1μg/mL PD-L1抗体与3D-AuNPs反应，后用缓冲液洗涤芯片表面以洗脱未连接的抗体，

(c)将芯片与1mg/mL的BSA溶液反应半小时，以避免芯片表面上的非特异性吸附，同时，所述Homing‍ Peptide功能化的磁包银纳米颗粒在25℃与不同浓度的分析物反应30min，然后用外磁分离，

(d)将步骤(c)反应后的Homing ‍Peptide功能化的磁包银纳米颗粒添加到芯片表面，从而被表面修饰PD-L1抗体特异性识别，信号可以通过Homing‍ Peptide功能化的磁包银纳米颗粒进一步放大。

3.一种利用如权利要求1所述的非疾病诊断的检测PD-L1的免疫传感器系统检测PD-L1的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(i)Homing‍ Peptide功能化的磁包银纳米颗粒在25℃与不同浓度的分析物反应30min，然后用外磁分离，

(ii)将步骤(i)反应后的Homing ‍Peptide功能化的磁包银纳米颗粒添加到芯片表面，从而被表面修饰PD-L1抗体特异性识别，

(iii)通过SPR或者电化学定量监测PD-L1浓度。