[发明专利]从藜麦中提取抑制白色念珠菌蛋白的方法

权利要求书

1.从藜麦中提取抑制白色念珠菌蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1.将藜麦种子干燥打粉并用淀粉酶处理除去淀粉；

S2.利用混合溶剂提取藜麦粗蛋白；

S3.所述的粗蛋白加入固体硫酸铵，使其饱和度达到40％，离心，弃沉淀，保留上清液；上清液中加入固体硫酸铵，使其饱和度达到65％，离心，收集沉淀；

S4.处理Sephadex G-75填料，装层析柱，内径2cm，长60cm，装好后利用生理盐水进行平衡柱子，备用；将步骤S3收集的沉淀，适当进行复溶，之后适量上样，用生理盐水进行洗脱；弃去第一个出现的蛋白峰，收集第二个蛋白峰，直至基线平稳；

S5.将步骤S4收集第二个蛋白峰利用透析袋进行浓缩，浓缩后的蛋白进行浓度和抑制白色念珠菌的检测；

S6.利用沙保氏培养基培养白色念珠菌至对数生长期，取少量菌液进行离心，收集菌体；利用生理盐水稀释菌体至1麦氏单位后备用；

S7.利用牛津杯法进行进行抑菌活性检测；加入检测蛋白溶液80ul；阳性对照为氟康唑，阴性对照为蛋白提取溶剂。

2.根据权利要求1所述的从藜麦中提取抑制白色念珠菌蛋白的方法，其特征在于S2中所述的混合溶剂组成：5mM磷酸钠，10mM氯化钠和1Mm EDTA，pH 7.0；料液体积比1:2，4℃提取1小时，离心，获得粗蛋白。

3.根据权利要求1所述的从藜麦中提取抑制白色念珠菌蛋白的方法，其特征在于，步骤S2、S3中的离心条件为：4℃，10000转，离心20min。

4.根据权利要求1所述的从藜麦中提取抑制白色念珠菌蛋白的方法，其特征在于，步骤S4中的洗脱条件为：流速1ml/min。