[发明专利]一种靶向肿瘤细胞的壳聚糖衍生物纳米级超声造影剂及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种靶向材料SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖，其特征在于，具有如下所示的结构：

，

所述靶向材料SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖通过巯基-马来酰亚胺反应制备，对于去势抵抗性前列腺癌细胞具有靶向结合能力。

2.如权利要求1所述的靶向材料SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将壳聚糖溶于去离子水中，加入MAL-聚乙二醇2000-NHS溶解完全，壳聚糖和MAL-聚乙二醇2000-NHS的摩尔当量比为1:1，室温下搅拌反应；向反应液中缓慢滴加SP94短肽的DMF溶液，壳聚糖和SP94短肽的摩尔当量比为1:1，室温下继续反应；透析纯化后冷冻干燥，得靶向材料SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，满足以下条件之一项或多项：

i. 所述壳聚糖的重均分子量为3kDa~160kDa；

ii. 所述加入MAL-聚乙二醇2000-NHS后的反应时间为12-36h；

iii. 所述壳聚糖和SP94短肽的DMF溶液的质量体积比为（0.01-0.03）：1，单位为g/mL;

iv. 所述滴加SP94短肽后的反应时间为12-36h;

v. 所述透析的截留分子量为3000~10000Da。

4.权利要求1所述的靶向材料SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖在制备靶向肿瘤细胞的壳聚糖衍生物纳米级超声造影剂中的应用。

5.一种靶向肿瘤细胞的壳聚糖衍生物纳米级超声造影剂，其特征在于，以SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖为壳膜材料，其中，SP94短肽为靶向配体，壳膜内部包裹有全氟戊烷；所述靶向肿瘤细胞的壳聚糖衍生物纳米级超声造影剂的粒径为250~300nm。

6.权利要求5所述的靶向肿瘤细胞的壳聚糖衍生物纳米级超声造影剂的制备方法，包括步骤如下：

（1）将SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖溶解于去离子水中，得SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖溶液；

（2）将全氟戊烷、吐温20、卵磷脂分散于去离子水中，均质化，得混悬液；

（3）向步骤（2）制得的混悬液中逐滴加入步骤（1）制得的SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖溶液，均质化，制得悬乳液；

（4）将步骤（3）中制得的悬乳液室温静置后，低速离心，取上层液体，得靶向肿瘤细胞的壳聚糖衍生物纳米级超声造影剂。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，满足以下条件之一项或多项：

i. 步骤（1）中所述SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖在SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖溶液中的质量体积百分比为1-3%，单位为g/mL；

ii. 步骤（2）中所述卵磷脂在混悬液中的质量体积百分比为0.01-0.2%，单位为g/mL；所述卵磷脂和全氟戊烷的质量体积比为（0.01-0.05）:1，单位为g/mL；所述卵磷脂和吐温20的质量体积比为（0.2-0.8）:1，单位为g/mL；

iii. 步骤（2）中所述均质的速度为12000-20000rpm，时间为1-3min；

iv. 步骤（3）中所述混悬液与SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖溶液的体积比为（10~15）:1；

v. 步骤（3）中所述均质的速度为12000-20000rpm，时间为1-3min；

vi. 步骤（4）中所述室温静置的时间为10-30min；

vii. 步骤（4）中所述低速离心为100-800rpm离心2-8min。

8.一种靶向肿瘤细胞的携载阿霉素的壳聚糖衍生物纳米级超声造影剂，其特征在于，以SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖为壳膜材料，其中，SP94短肽为靶向配体；壳膜内部包裹有阿霉素和全氟戊烷；SP94短肽-聚乙二醇2000-壳聚糖和阿霉素的质量比为1:（1-2）；纳米级超声造影剂的粒径为300~400nm。