[发明专利]一种检测松材线虫的HDA等温扩增试剂检测方法

权利要求书

1.一种检测松材线虫的试剂盒，其特征在于：该试剂盒由以下几种试剂组成：

试剂A：松材线虫组织裂解液，为2.5mmol/L DTT、1.125％Tween20、0.025％Gelatin缓冲液；

试剂B：HDA等温扩增缓冲液，其中含有特定引物BxHDAF及BxHDAR；其序列为：

BxHDAF 5′-GGGTCGATGAAGAACGCAGTGAATTGC-3′；

BxHDAR 5′-CAAAGCCCAAGAGCGCAATATGCATTC-3′；

试剂C：HDA等温扩增反应酶液，其中含有解旋酶。

试剂D液：阳性对照，为Bx阳性DNA模板。

2.根据权利要求1所述的检测松材线虫试剂盒，其特征在于：所述试剂B中含有的松材线虫等温扩增缓冲液每管组成为：

5μ110×等温扩增缓冲液，

2μ1100mM MgSO4，

4μ110mM NaCl，

3.5μ110mM dNTP Mixture，

1μ110pM BxHDAR,

1μ110pM BxHDAF。

3.根据据权利要求1所述的检测松材线虫试剂盒，其特征在于：所述试剂D中HDA等温扩增反应酶混合液每管组成为

2U大肠杆菌解旋酶Ⅱ(UvrD)解旋酶；

Bst DNA Polymerase。