[发明专利]一种生产丝裂霉素的新方法

权利要求书

1.一种生产丝裂霉素的新方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、丝裂霉素发酵液预处理：将丝裂霉素发酵液转移至预处理罐，对发酵液进行搅拌并同时加入珍珠岩，再用1％质量浓度的氢氧化钠溶液调节料液pH；

S2、板框过滤：将料液压入板框中的丙纶滤布进行过滤，并收集滤液；

S3、过滤：将滤液用袋式过滤器进行过滤，从而除去滤液中的颗粒杂质；

S4、提取步骤：将步骤S3中的滤液经过大孔树脂进行第一次吸附、第一次洗脱，得到第一次洗脱液；将第一次洗脱液进行萃取，得到萃取液；将萃取液经过大孔树脂进行第二次吸附、第二次洗脱，得到第二次洗脱液；将第二次洗脱液经工业色谱进行纯化，得到料液；将料液经过大孔树脂进行第三次吸附、第三次洗脱，得到第三次洗脱液；

S5、精制步骤：将第三次洗脱液经过浓缩、结晶、过滤、洗涤、干燥、粉碎，从而得到所述丝裂霉素。

2.根据权利要求1所述的生产丝裂霉素的新方法，其特征在于，步骤S1中，丝裂霉素发酵液与珍珠岩的重量比为100:2至100:4。

3.根据权利要求1所述的生产丝裂霉素的新方法，其特征在于，步骤S1中调节料液pH的范围为7至9。

4.根据权利要求1所述的生产丝裂霉素的新方法，其特征在于，步骤S4具体包括如下步骤：

将步骤S3中的滤液经过大孔树脂进行第一次吸附，第一次吸附完成后，用去离子水冲洗树脂至洗涤液颜色低于Y3#色，洗涤结束后进行空压吹干，然后通入乙酸乙酯进行第一次洗脱，并使用磷酸缓冲液调节pH为7至8，收集第一次洗脱液至颜色低于Y5#色后停止洗脱；

通过氯化钠缓冲液对第一次洗脱液进行萃取，得到萃取液；

将萃取液经过大孔树脂进行第二次吸附，然后使用5至30％质量浓度的甲醇水溶液进行二次洗脱，得到二次洗脱液；

将二次洗脱液经过工业色谱上柱、水洗、10％质量浓度甲醇洗涤、20至25％质量浓度甲醇进行纯化，从而得到料液；

将料液经过大孔树脂进行第三次吸附、上柱结束后吹干，然后使用纯甲醇进行第三次洗脱，得到第三次洗脱液。

5.根据权利要求1所述的生产丝裂霉素的新方法，其特征在于，步骤S5具体包括如下步骤：

将第三次洗脱液通过减压浓缩，浓缩结束后，通过降温冷却至25℃以下进行冷却结晶，然后将结晶液进行抽滤至无液体流出后通过加入无水乙醚分两次对滤饼进行洗涤，当洗涤液的颜色低于Y1#色，停止洗涤；

洗涤结束后在真空状态下进行干燥，从而得到蓝紫色结晶性粉末。

6.根据权利要求4所述的生产丝裂霉素的新方法，其特征在于，第一次吸附时控制上柱流量为1至4倍树脂量L/H，去离子水冲洗树脂时控制水洗流量为1至4倍树脂量L/H，第一次洗脱时控制洗脱流量为0.5至2倍树脂量L/H；工业色谱流量控制在0.5至5倍树脂量L/H；第三次吸附时控制上柱流量为1至4倍树脂量L/H，第三次洗脱时控制洗脱流量为0.5至2倍树脂量L/H。

7.根据权利要求4所述的生产丝裂霉素的新方法，其特征在于，磷酸缓冲液由KH₂PO₄、Na₂HPO₄以及去离子水组成，并且KH₂PO₄、Na₂HPO₄以及去离子水的重量比为1：15：5000。

8.根据权利要求4所述的生产丝裂霉素的新方法，其特征在于，氯化钠缓冲液由KH₂PO₄、Na₂HPO₄、NaCl以及去离子水组成，并且KH₂PO₄、Na₂HPO₄、NaCl以及去离子水的重量比为1：15：250:5000。