[发明专利]一种重组人组织型纤溶酶原激酶衍生物包涵体增溶液的透析方法及应用

权利要求书

1.一种重组人组织型纤溶酶原激酶衍生物包涵体增溶液的透析方法，其特征在于，包含如下步骤：

S1.增溶液的配制：配制pH为8.6，包含6mol/L盐酸胍，50mmol/L Tris，1mmol/L EDTA·Na₂的水溶液作为增溶液；

S2.增溶透析内液的制备：将重组人组织型纤溶酶原激酶衍生物包涵体与步骤S1增溶液按照1.5kg：30L的比例混合；再向其中加入二硫苏糖醇至浓度为40mmol/L，调整pH为8.6，混合均匀，再调整pH为3.0，即得到增溶透析内液；

S3.透析外液的配制：配制pH为3，包含7～10mol/L尿素，1mmol/L EDTA·Na₂的水溶液作为透析外液；

S4.超滤器透析：取增溶透析内液先浓缩至原体积的一半，加入等体积的透析外液混合后再次浓缩至原体积的一半，得到透析内液；然后使用超滤器浓缩透析内液，连续加入透析外液进行换相，保持超滤器透过速度和透析外液加入速度均为2.5L/h，透析换相时间为3.25～4小时；所述超滤器为截留量为10kD的膜包。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S3所述透析外液中尿素的浓度为8～10mol/L。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，步骤S3所述透析外液中尿素的浓度为8mol/L。

4.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤S4所述透析换相时间为4小时。

5.权利要求1～4任一所述方法在对重组人组织型纤溶酶原激酶衍生物包涵体的复性纯化中的应用。