[发明专利]一种尿微量白蛋白检测试剂及其制备方法

说明书

本发明提供一种尿微量白蛋白检测试剂及其制备方法，包括试剂1和试剂2；试剂1的组分和浓度如下：三(羟甲基)氨基甲烷缓冲液：200‑500mM；聚乙二醇二琥珀酸：5‑8g/L；月桂酰胺丙基羟磺基甜菜碱：1‑5g/L；肌醇：0.1‑0.5g/L；曲拉通X‑100：0.1‑0.5g/L；叠氮化钠：0.1g/L；溶剂为纯化水，试剂1的PH为6.5～7.5；试剂2的组分和浓度如下：三(羟甲基)氨基甲烷缓冲液：50‑200mM；氯化钠：20‑40g/L；氯化钾：20‑40g/L；羊抗人尿微量白蛋白抗体包被胶乳颗粒：1‑3％；椰油酸二乙醇酰胺：2‑5g/L；聚甘油‑3‑甲基葡糖二硬脂酸酯：2‑5g/L；肌醇：0.1‑0.5g/L；曲拉通X‑100：0.1‑0.5g/L；叠氮化钠：0.1g/L；溶剂为纯化水，试剂2的PH为6.5～7.5。本发明检测灵敏度高，可报告范围广，稳定性好。

技术领域

本发明属于一种尿微量白蛋白检测试剂及其制备方法，具体涉及尿微量白蛋白检测领域。

背景技术

1982年Viberti等发现了糖尿病患者尿中总蛋白在正常范围，而尿白蛋白排泄增加的现象，首先提出了尿微量白蛋白的概念，并指出这种蛋白的出现是肾病发生的早期预兆。随着检测技术的进步，目前尿微量白蛋白主要用于对糖尿病、高血压患者的早期监测，以便及时采取保护肾功能的措施，如限制蛋白的摄入量、禁烟、及时控制血糖和血压等。因此，及时检测尿微量白蛋白，对控制和防止早期肾病的发生极为重要。

正常情况下，尿是在肾脏内形成的。体内血流经肾小球毛细管时，其中的细胞、大分子蛋白质和脂类等胶体被截留。病理情况下，由于肾小球内压力增高滤过增加或是基底膜改变，导致高滤过率而出现蛋白尿。健康成年人尿微量白蛋白参考区间为＜30mg/L，当值介于30-200mg/L时则为微量白蛋白尿期，临床可诊断为早期糖尿病肾病，一般认为此时病变经治疗尚可复原，尿微量白蛋白可转为阴性。当值＞200mg/L，诊断为糖尿病肾病，需对糖尿病人早期采取保护肾功能的措施，限制蛋白摄入，控制血糖、血压、禁烟，防止进入不可逆转期(值＞300mg/L)。由于正常人尿液中的尿微量白蛋白含量较低，因此对检测试剂的灵敏度要求较高，又因糖尿病肾病病人进入不可逆转期时尿中尿微量白蛋白含量可达300mg/L以上，因此对检测试剂的可报告范围也有适当要求，以便减少样本稀释的工作量，提高检测效率。

目前市场上尿微量白蛋白的检测方法有免疫扩散法、免疫电泳法、免疫比浊法、放射免疫法、酶联免疫吸附法、胶体金法等。其中免疫扩散法、免疫电泳法、酶联免疫吸附法主要靠手工操作，步骤繁琐且准确度、批间差异大，检测时间长，不适合医院检验科使用。放射免疫法准确度较高，但价格昂贵，操作繁琐。胶体金法因受自身方法学的局限，一般只能达到定性诊断，不能满足医生定量需求，另外由于试纸很难做到结构均匀一致，材料、薄厚、疏密程度也很难完全相同，致使样本检测结果在不同测试卡上的重复性较差。所以现在多采用免疫比浊法测定。胶乳免疫比浊法属于普通免疫比浊技术的衍生技术，克服了普通免疫比浊技术信号量非常有限的缺点，使抗体体积有了数量级上的增长，大幅提升了可检测性，但该方法也存在不足之处，如胶乳微球的粒径大小对试剂的测试性能会产生较大影响，粒径过大，由于微球表面积跟自身体积比率小，易造成单位体积内抗体包被量小，导致抗原过剩，无法对浓度高的分析物进行检测，粒径过小则胶乳表面积跟自身体积比率大，不易产生凝集现象，导致吸光度变化缓慢，试剂的检测灵敏度降低。

发明内容

本发明的目的是提供一种检测灵敏度高，可报告范围广，稳定性好的胶乳免疫比浊法尿微量白蛋白检测试剂及其制备方法。

本发明提供了如下的技术方案：

一种尿微量白蛋白检测试剂及其制备方法，包括试剂1和试剂2；

试剂1的组分和浓度如下：

三(羟甲基)氨基甲烷缓冲液：200-500mM

聚乙二醇二琥珀酸：5-8g/L

月桂酰胺丙基羟磺基甜菜碱：1-5g/L