[发明专利]一种基于差分阻抗颗粒计数的免疫分析方法

权利要求书

1.一种基于差分阻抗颗粒计数的免疫分析方法，其特征在于包括以下步骤：

1）以高分子绝缘微球为信号探针，将生物识别分子与高分子绝缘微球偶联，然后将待测目标物与其对应的生物识别分子进行免疫反应，使高分子绝缘微球的粒径和数量发生变化；

2）将反应液注入颗粒计数通道，同时向颗粒计数通道内高速注入缓冲液，基于流体力学原理形成层流，使反应液中的高分子绝缘微球稳定有序地通过颗粒计数通道；

3）在颗粒计数通道的两端设置正、负电极，高分子绝缘微球通过时导致电极间的阻抗变化，进而导致电极间的电势信号发生变化，收集电势信号，经放大、滤波处理后对高分子绝缘微球的颗粒粒径和数量进行分析，进而得到待测目标物的含量，

所述高分子绝缘微球的粒径为1 μm或3 μm，高分子绝缘微球是聚苯乙烯微球或聚丁二烯微球或聚异戊二烯微球；所述颗粒计数通道的内径为10-100 μm；

所述颗粒计数通道内，缓冲液的流速是反应液的5-7倍，所述反应液的流速为5-10 μL/min；

当待测目标物的基质成分简单时，将待测目标物与其对应的生物识别分子进行均相免疫反应并将反应液直接注入颗粒计数通道，其中，当待测目标物为生物大分子时，所述生物识别分子为与待测目标物对应的捕获抗体和检测抗体；当待测目标物为农兽药小分子时，所述生物识别分子为与待测目标物对应的抗体和完全抗原；

当待测目标物的基质成分复杂时，将与待测目标物对应的捕获抗体和检测抗体分别与纳米磁颗粒和高分子绝缘微球偶联，进行免疫反应并将反应液经磁分离后再注入颗粒计数通道。

2.如权利要求1所述基于差分阻抗颗粒计数的免疫分析方法，其特征在于：当所述信号探针的直径为3 μm时，纳米磁颗粒与信号探针的质量比为3:1；当所述信号探针的直径为1μm时，纳米磁颗粒与信号探针的质量比为2:1。

3.如权利要求1所述基于差分阻抗颗粒计数的免疫分析方法，其特征在于：所述免疫反应和颗粒计数均在微流控芯片上进行，所述微流控芯片上设有反应通道和缓冲液通道，所述反应通道的内径为50-500 μm。

4.如权利要求1所述基于差分阻抗颗粒计数的免疫分析方法，其特征在于：所述反应通道呈S形。