[发明专利]控制脂肽脂链长度改变的关键交换结构域及其突变体和应用

权利要求书

1.一种控制脂肽脂链长度改变的关键交换结构域，所述的关键交换结构域为起始缩合结构域及其与临近的腺苷酰化结构域的交界，该起始缩合结构域名为Cs结构域，该腺苷酰化结构域名为A结构域；所述的Cs结构域与A结构域的交界名为Cs-A linker区域；其中所述Cs结构域是指在脂肽的生物合成过程中负责催化起始的脂酰基底物与第一个氨酰基底物进行缩合的结构域，所述Cs结构域对脂肽的脂链具有特异性并介导脂肽生物合成的起始；所述的A结构域是指催化游离氨基酸形成上游Cs结构域的氨酰基底物，该氨酰基底物为氨酰基-肽载体蛋白；所述的交换结构域是Cs结构域及Cs-A linker区域，命名为Cs-AL结构域；

其特征在于：

所述控制脂肽脂链长度改变的关键交换结构域是指根霉酰胺的Cs-AL结构域、根霉肽的Cs-AL结构域、滑杆菌素的Cs-AL结构域或滑杆菌肽的Cs-AL结构域；其中所述根霉酰胺的Cs-AL结构域的氨基酸序列如SEQ NO.1所示；所述根霉肽的Cs-AL结构域的氨基酸序列如SEQ NO.2所示；所述滑杆菌素的Cs-AL结构域的氨基酸序列如SEQ NO.3所示；所述滑杆菌肽的Cs-AL结构域的氨基酸序列如SEQ NO.4所示；其中所述根霉酰胺缩写为rzmA，根霉肽缩写为holA，其生物合成基因簇均来源于细菌Paraburkholderia rhizoxinica HKI 454；所述滑杆菌素缩写为glbA，滑杆菌肽缩写为glpA，其生物合成基因簇均来源于细菌Schlegelella brevitalea DSM 7029。

2.利用对权利要求1所述控制脂肽脂链长度改变的关键交换结构域进行Cs-AL结构域的交换后获得的突变体，其特征在于：根霉酰胺的Cs-AL结构域与根霉肽的Cs-AL结构域进行互换后获得的带根霉肽Cs-AL结构域的根霉酰胺生物合成基因簇突变体，命名为rzmACsholA；根霉肽的Cs-AL结构域被根霉酰胺的Cs-AL结构域替换后获得的带根霉酰胺Cs-AL结构域的根霉肽生物合成基因簇突变体，命名为holACsrzmA；滑杆菌素的Cs-AL结构域被根霉肽的Cs-AL结构域替换后获得的带根霉肽Cs-AL结构域的滑杆菌素生物合成基因簇突变体，命名为glbACsholA；滑杆菌素的Cs-AL结构域被滑杆菌肽的Cs-AL结构域替换后获得的带滑杆菌肽Cs-AL结构域的滑杆菌素生物合成基因簇突变体，命名为glbACsglpA；其中，所述根霉酰胺Cs-AL结构域的氨基酸序列如SEQ NO.1所示，所述根霉肽Cs-AL结构域的氨基酸序列如SEQ NO.2所示，所述滑杆菌素的Cs-AL结构域的氨基酸序列如SEQ NO.3所示，所述滑杆菌肽的Cs-AL结构域的氨基酸序列如SEQ NO.4所示。

3.权利要求2所述突变体在制备带有不同脂链长度脂肽衍生物中的应用，其特征在于：突变体rzmACsholA在异源宿主Schlegelella brevitalea DSM 7029中催化C8脂链长度rzmA衍生物的合成；突变体holACsrzmA在异源宿主Schlegelella brevitalea DSM 7029中催化C2脂链长度holA衍生物的合成；突变体glbACsholA在同源宿主Schlegelellabrevitalea DSM 7029中催化C8脂链长度glbA衍生物的合成；突变体glbACsglpA在同源宿主Schlegelella brevitalea DSM 7029中催化C10脂链长度glbA衍生物的合成。