[发明专利]一种基于毛细管电泳的同时检测三种蚊媒病毒的引物组及其应用在审
| 申请号: | 202011418380.2 | 申请日: | 2020-12-07 |
| 公开(公告)号: | CN112593009A | 公开(公告)日: | 2021-04-02 |
| 发明(设计)人: | 耿合员;刘冬志;田锋;孙悦;王凌冰;陆志;费吟濠 | 申请(专利权)人: | 中华人民共和国无锡海关;新疆环疆绿源环保科技有限公司;新疆国际旅行卫生保健中心(乌鲁木齐海关口岸门诊部) |
| 主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司: | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人: | 曹祖良;张仕婷 |
| 地址: | 214101 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 基于 毛细管 电泳 同时 检测 三种蚊媒 病毒 引物 及其 应用 | ||
1.一种基于毛细管电泳的同时检测三种蚊媒病毒的引物组,其特征是:包括3组引物对,分别是针对蚊媒登革热病毒DENV的引物对1,针对蚊媒黄热病毒YFV的引物对2和针对蚊媒病毒ZIKV的引物对3;每组引物对均包括一个上游引物和下游引物。
2.如权利要求1所述基于毛细管电泳的同时检测三种蚊媒病毒的引物组,其特征是:具体包括针对蚊媒病毒DENV的上游引物F1,其序列如SEQ ID No.1所示,下游引物R1,其序列如SEQ ID No.2所示;
针对蚊媒病毒YFV的上游引物F2,其序列如SEQ ID No.3所示,下游引物R2,其序列如SEQ ID No.4所示;
针对蚊媒病毒ZIKV的上游引物F3,其序列如SEQ ID No.5所示,下游引物R3,其序列如SEQ ID No.6所示。
3.一种包括权利要求1或2所述引物组的检测盒。
4.权利要求3所述检测盒的应用,其特征是:通过PCR反应同时检测登革热病毒DENV、黄热病毒YFV和寨卡病毒ZIKV。
5.根据权利要求3所述检测盒的应用,其特征是:所述PCR检测时,采用的分子marker以25μL反应体系为例具体配置如下,使用量终浓度:2Х反应液:12.5μL;DNA聚合酶:0.5μL;RT逆转录酶:0.5μL;上游引物:1μL;下游引物:1μL;病毒模板RNA:5μL;ddH2O:4.5μL;Up to 25μL。
6.根据权利要求3所述检测盒的应用,其特征是:所述上游引物和下游引物中,三对引物对的浓度一致;其中上游引物总浓度为2.5μM,下游引物总浓度为2.5μM;病毒模板RNA包括对应的三种病毒模板RNA,三者浓度均为10ng/μL。
7.根据权利要求3所述检测盒的应用,其特征是:所述PCR检测时,检测样本以25μL反应体系为例具体配置如下,使用量终浓度:2Х反应液:12.5μL;DNA聚合酶:0.5μL;RT逆转录酶:0.5μL;上游引物:1μL;下游引物:1μL;待测样本:5μL;ddH2O:4.5μL;Up to 25μL。
8.根据权利要求3所述检测盒的应用,其特征是:PCR反应程序如下:
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