[发明专利]一种动物血红蛋白多肽微胶囊制备方法在审
申请号: | 202011411359.X | 申请日: | 2020-12-03 |
公开(公告)号: | CN112546022A | 公开(公告)日: | 2021-03-26 |
发明(设计)人: | 牛海涛;王永华;李丹;骆磊 | 申请(专利权)人: | 青岛大学附属医院 |
主分类号: | A61K9/50 | 分类号: | A61K9/50;A61K38/42;A61K47/42;A61K47/36;A61P7/06;C07K14/805;C07K1/14;C12P21/06 |
代理公司: | 青岛华慧泽专利代理事务所(普通合伙) 37247 | 代理人: | 李新欣 |
地址: | 266071 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 动物 血红蛋白 多肽 微胶囊 制备 方法 | ||
1.一种动物血红蛋白多肽微胶囊制备方法,其特征在于:包括如下步骤:
S1、制备血红蛋白;
S2、制备血红蛋白多肽;
S3、制备蛋白多肽微胶囊。
2.根据权利要求1所述的动物血红蛋白多肽微胶囊制备方法,其特征在于:所述S1中,制备血红蛋白的方法包括如下步骤:
S1.1、将新鲜动物血液与抗凝剂按照体积比为6:1混合后过滤,将过滤后的血液按照体积比为1:1加入0.9%NaCl水溶液进行洗涤;
S1.2、将混合后的溶液转移至离心管中,设置温度为4℃、离心转速3000rpm、离心时间10min,弃上清液,反复洗涤两次、离心,后收集下层红细胞;
S1.3、将收集的红细胞用4~6倍体积冷生理盐水再洗涤2~3次后,在42℃下超声25min进行溶血处理,超声粉碎时加入适当体积的水,保持操作时溶液处于流动状态;
S1.4、将充分溶血的红细胞溶液置于离心机中,设置温度4℃、离心转速4200rpm、离心时间15min,取上层液得到血红蛋白。
3.根据权利要求2所述的动物血红蛋白多肽微胶囊制备方法,其特征在于:所述S1.1中,抗凝剂选用4%的柠檬酸钠抗凝剂。
4.根据权利要求2所述的动物血红蛋白多肽微胶囊制备方法,其特征在于:所述S1.3中,进行溶血处理的操作过程中,超声波细胞破碎仪的功率为200W。
5.根据权利要求1所述的动物血红蛋白多肽微胶囊制备方法,其特征在于:所述S2中,制备血红蛋白多肽的方法包括如下步骤:
S2.1、称取一定的血红蛋白,用蒸馏水调节血红蛋白溶液浓度至10.0%;
S2.2、加入一定的风味蛋白酶进行酶解,加入稀HCl调节pH为6.5,设定温度为53℃、水解时间5h;
S2.3、再加入适量碱性蛋白酶,加入稀NaOH调节pH至10.0,设定温度为50℃,酶解4h;
S2.4、将酶解后的血红蛋白溶液置于水浴锅中,温度100℃,灭酶15min;
S2.5、将灭酶后的血红蛋白置于离心机中,设置离心转速8200rpm、冷冻离心30min,取上清液得到血红蛋白多肽溶液;
S2.6、选用喷雾干燥法,设定喷雾干燥机的进风温度160~180℃、进料流量300~350ml/h、进风量35~38m3/h,制得血红蛋白多肽粉。
6.根据权利要求5所述的动物血红蛋白多肽微胶囊制备方法,其特征在于:所述S2.2中,加入风味蛋白酶的含量为20000U/g。
7.根据权利要求5所述的动物血红蛋白多肽微胶囊制备方法,其特征在于:所述S2.3中,加入碱性蛋白酶的含量为8500U/g。
8.根据权利要求1所述的动物血红蛋白多肽微胶囊制备方法,其特征在于:所述S3中,制备蛋白多肽微胶囊的方法包括如下步骤:
S3.1、将明胶与胶原蛋白肽粉按体积比为1:1.2混合,加入65~68℃的蒸馏水搅拌40min,至完全溶解,配制成质量浓度为5.5%的凝胶溶液;
S3.2、向完全溶解的凝胶溶液中缓慢滴加用量为明胶2倍的麦芽糊精,并同时加入一定量的增塑剂、表面活性剂,保持温度60~62℃,缓慢搅拌至麦芽糊精完全溶解,配置壁材溶液;
S3.3、取新鲜血红蛋白多肽溶液,按2~2.2:1的用量比例加入多孔淀粉,设定温度30~35℃,使多孔淀粉吸附至饱和,配置微胶囊芯材溶液;
S3.4、设定芯材与壁材体积比为3:2,取芯材溶液逐滴滴入壁材溶液中,控制固定物含量为15~18%,混合搅拌30min;
S3.5、将上述溶液置于超声波清洗仪中,设定温度40~42℃、功率150~160W,超声30min;
S3.6、使用喷雾干燥法对微胶囊进行干燥,设定喷雾干燥机的进风温度160~180℃、出风温度110℃、进料速率260~300ml/h、撞针时间2s、时间间隔2s、进风量22~25m3/h,制得血红蛋白多肽微胶囊。
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