[发明专利]一种六基因组合在水稻种子中提高VB2含量的应用及方法

权利要求书

1.六基因组合在水稻种子中提高VB2含量的应用，其特征在于，所述六基因分别为ScRIB1S、ScRIB7S、ScRIB2S、ScRIB3S、ScRIB54和ScRIB5S基因，所述ScRIB1S基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述ScRIB7S基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述ScRIB2S基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述ScRIB3S基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述ScRIB4S基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述ScRIB5S基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。

2.如权利要求1所述的六基因组合在水稻种子中提高VB2含量的应用，其特征在于，所述ScRIB1S、ScRIB7S、ScRIB2S、ScRIB3S、ScRIB4S和ScRIB5S基因分别由酿酒酵母中的ScRIB1、ScRIB7、ScRIB2、ScRIB3、ScRIB4和ScRIB5基因优化得到。

3.如权利要求1所述的六基因组合在水稻种子中提高VB2含量的应用，其特征在于，所述ScRIB1S、ScRIB7S、ScRIB2S、ScRIB3S、ScRIB54和ScRIB5S六基因在水稻种子中的表达顺序为ScRIB1S-ScRIB7S-ScRIB2S-ScRIB3S-ScRIB4S-ScRIB5S。

4.一种利用六基因组合提高水稻种子胚乳中VB2含量的方法，包括以下步骤：

1)根据水稻的密码子偏好性对酿酒酵母的ScRIB1、ScRIB7、ScRIB2、ScRIB3、ScRIB4和ScRIB5基因的序列进行优化，获得ScRIB1S、ScRIB7S、ScRIB2S、ScRIB3S、ScRIB4S和ScRIB5S六个基因序列，所述ScRIB1S基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述ScRIB7S基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述ScRIB2S基因的具体核苷酸序列如SEQ IDNO.3所示，所述ScRIB3S基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述ScRIB4S基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述ScRIB5S基因的具体核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；

2)将ScRIB1S、ScRIB7S、ScRIB2S、ScRIB3S、ScRIB7S和ScRIB8S六个基因分别与水稻胚乳特异储存蛋白GluB-1基因启动子和终止子融合，分别构建基因表达盒元件；

3)将步骤2)获得的6个基因表达盒元件分别连接入植物表达载体，获得含ScRIB1S、ScRIB7S、ScRIB2S、ScRIB3S、ScRIB4S和ScRIB5S六基因表达盒的植物多基因转化载体；

4)将步骤3)中获得的植物多基因转化载体转入农杆菌，转化至水稻愈伤组织，获得胚乳中VB2含量提高的水稻。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤2)中，所述水稻胚乳特异性储存蛋白GluB-1基因启动子序列如SEQ ID NO.7所示；水稻胚乳特异性储存蛋白GluB-1基因终止子序列如SEQ ID NO.8所示。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤3)中，所述植物表达载体为pCAMBIA1301。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤4)中，所述水稻为水稻品种中花11。