[发明专利]一种分离检测巯基乙酸的方法

说明书

本发明涉及一种分离检测巯基乙酸的方法，属于分析化学领域。所述方法中，在加碱条件下，采用过氧化氢的水溶液与巯基乙酸进行氧化反应，再以HPLC‑MS检测其氧化产物；检测时采用高强度硅胶颗粒为填料的色谱柱，流动相分为A相和B相，A相为酸的水溶液，B相为乙腈。本发明的方法灵敏度高，专属性好，准确度可靠。

技术领域

本发明涉及分析化学领域，具体涉及一种分离检测巯基乙酸的方法。

背景技术

巯基乙酸化学式为C₂H₄O₂S，结构式为HSCH₂COOH，其经常用作为原料药合成的中间物料，也用作为药物制剂中的抗氧剂和稳定剂，以增强主药的稳定性，延长药物制剂的有效期，但是巯基乙酸具有高毒性，因此需要对其进行控制。

目前常用巯基乙酸的检测方法为高效液相色谱法，也有报道采用离子色谱法、薄层色谱法等进行检测，我们在方法开发过程中发现使用上述检测手段对巯基乙酸本体进行检测时，发现巯基乙酸在较低浓度下存在被氧化或者被重金属络合而不稳定现象，因而对检测结果的准确性产生影响。为了避免检测时巯基乙酸出现不稳定的情况，同时也为了更好更准确地控制产品质量，保证用药安全性，需要研究适合于药物中巯基乙酸的分析检测方法。

本发明采用在碱性环境下加入H₂O₂，巯基乙酸被氧化生成2,2'-二硫代二乙酸，通过对2,2'-二硫代二乙酸检测可间接测定巯基乙酸的含量，同时可以也避免某些药品本身的基质干扰，而且还可以避免巯基乙酸在检测中不稳定的现象。具体反应式如下：

发明内容

本发明的目的在于提供一种分离检测药物中巯基乙酸的方法，从而实现药物中巯基乙酸的分离和测定。本发明提供的方法能够有效分离测定药物中有关物质巯基乙酸的含量，方法的灵敏度高，专属性好，准确度可靠，可用于药物中有关物质巯基乙酸的质量控制。

一种分离检测巯基乙酸的方法，其包括：在加碱条件下，采用过氧化氢的水溶液与含巯基乙酸的待测样品进行氧化反应，再以HPLC-MS检测其氧化产物；检测时采用高强度硅胶颗粒为填料的色谱柱，流动相分为A相和B相，A相为酸的水溶液，B相为乙腈。

所述的碱选自NaOH、KOH或氨水中的一种。在一些实施例中，所述的碱选自氨水，有利于氧化反应的进行。

所述氧化反应的时间可为0.1h-1h。在一些实施例中，氧化反应的时间可为0.1h-0.5h。在一些实施例中，氧化反应的时间可为0.5h-1h。在一些实施例中，氧化反应的时间可为0.1h。在一些实施例中，氧化反应的时间可为0.5h。在一些实施例中，氧化反应的时间可为1h。

所述氧化反应的温度可为0℃至40℃。在一些实施例中，所述氧化反应的温度为0℃至25℃。在一些实施例中，所述氧化反应的温度为25℃至35℃。在一些实施例中，所述氧化反应的温度可为35℃至40℃。在一些实施例中，所述氧化反应的温度为0℃，25℃，35℃，或40℃。

所述色谱柱的填料为高强度硅胶颗粒(HSS)。

在一些实施例中，所述色谱柱可为WatersHSS T3。

所述酸的水溶液选自甲酸水溶液或者乙酸水溶液中的至少一种。在一些实施例中，所述酸的水溶液为甲酸水溶液。

所述的酸与水的体积比(V/V)为0.5:1000至2:1000。在一些实施例中，所述的酸与水的体积比(V/V)为1:1000。

在一些实施例中，A相与B相的体积比为10:90至95:5。

在一些实施例中，A相与B相的体积比(V/V)为0-10min：流动相A:流动相B(V/V)＝95:5；10.1-15min：流动相A:流动相B(V/V)＝10:90。