[发明专利]一种中和新冠病毒新表位的全人单克隆抗体17-2及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种中和新冠病毒新表位的全人单克隆抗体17‑2及其应用。本发明通过B细胞培养及单克隆抗体技术，成功筛选出针对S2的中和抗体17‑2。本发明提供的抗体17‑2，可与S蛋白及S2结合，其EC50分别为0.034μg/ml和0.038μg/mL，可有效中和SARS‑CoV‑2病毒。与其它表位的S1‑RBD和S1‑NTD抗体联合应用于SARS‑CoV‑2感染的预防和治疗。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种中和新冠病毒新表位的全人单克隆抗体17-2及其应用。

背景技术

单克隆抗体 (monoclonal antibodies, mAbs) 无疑是最具潜力的一类用于诊断及治疗的生物制剂, 已应用于肿瘤、自身免疫性疾病及感染性疾病的治疗。人单抗的快速分离、高通量测序技术及结构生物学的发展等使得抗体成为快速应对新发传染性疾病的重要手段。

SARS-CoV-2借助病毒表面的刺突蛋白即S蛋白介导病毒与细胞膜的融合，进而入侵宿主细胞。S蛋白包括S1和S2两个亚单位，S1分为N-端（NTD）和受体结合（RBD）区域。病毒感染时，首先是S1-RBD与细胞膜上的受体结合激发S2构象变化，导致病毒与细胞膜融合而进入靶细胞。S1-RBD被认为是诱导宿主中和抗体产生的主要蛋白。因此，面对新型冠状病毒肺炎疫情，大多研究者采用表达RBD重组蛋白分选出RBD特异B细胞策略获得中和抗体。目前已陆续报道了这类RBD抗体，有些具有很强的中和病毒的能力（1.Science. 2020 Aug21;369(6506):956-963. 2. Nature. 2020 Aug;584(7821):450-456.）。但采取这种策略会丢失一些不针对S1-RBD的抗体，甚至会错过机体产生的具有重要抗病毒作用的抗体。比如针对S2的抗体,可能通过阻碍病毒与宿主细胞膜的融合而发挥作用。因此研究人员改变策略，采用S蛋白筛选抗体。国内外已有研究团队从感染康复者获得针对S1-NTD中和抗体（1.Nature. 2020 Aug;584(7821):450-456. 2. Science. 2020 Aug 7;369(6504):650-655.）。但目前为止未见有获得S2中和抗体的报道。

采用针对单一表位单抗作为抗病毒治疗容易出现病毒逃逸现象，即所谓的耐药性。因此常常联用针对不同表位的2-3个抗体作为抗病毒治疗策略。例如在对埃博拉病毒感染治疗时采用3种单抗混合的ZMapp鸡尾酒疗法（N Engl J Med. 2016 Oct 13;375(15):1448-1456. ）。

发明内容

针对现有技术普遍存在的缺陷，本发明提供了一种中和新冠病毒新表位的全人单克隆抗体17-2及其应用。本发明提供的抗体17-2，可与S蛋白及S2结合，其EC50分别为0.034µg/ml和0.038µg/mL，可有效中和SARS-CoV-2病毒。与其它表位的S1-RBD和S1-NTD抗体联合应用于SARS-CoV-2感染的预防和治疗。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种单克隆抗体17-2，所述单克隆抗体17-2的重链可变区氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示；所述单克隆抗体17-2的轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

QLQLQESGPGLVKASETLSLTCTVSSGSVSSDSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTMSVDTSKNQFSLKLDSVTAADTAAYYCARGPLGLYYYYMDVWGKGTTVTVSS（SEQ ID NO.1）；

DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSINNYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFALTISGLQPEDFATYYCQESNSSPFTFGPGTKVDIK（SEQ ID NO.2）；