[发明专利]一种多能干细胞及其衍生物

权利要求书

1.一种多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干细胞或其衍生物的基因组中导入有第一核酸分子；

且，所述多能干细胞或其衍生物中的免疫应答相关基因的3’UTR区域导入有第二核酸分子；

所述第一核酸分子编码介导RNA干扰的小核酸分子，所述小核酸分子特异性靶向第二核酸分子的转录产物，且所述小核酸分子不靶向所述多能干细胞或其衍生物的任何其他的mRNA或lncRNA。

2.根据权利要求1所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干细胞或其衍生物的基因组中还导入有诱导型基因表达系统，用于调控第一核酸分子的表达。

3.根据权利要求1或2所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于，所述多能干细胞或其衍生物的基因组中还导入有CD47的表达序列。

4.根据权利要求1-3任一项所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述免疫应答相关基因包括：

(1)主要组织相容性复合体相关基因，包括B2M和CIITA中的至少一种；

(2)主要组织相容性复合体基因，包括HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DRA、HLA-DRB1、HLA-DRB3、HLA-DRB4、HLA-DRB5、HLA-DQA1、HLA-DQB1、HLA-DPA1和HLA-DPB1中的至少一种。

5.根据权利要求1-3任一项所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于，所述小核酸分子包括短干扰核酸、短干扰RNA、双链RNA，优选为miRNA、shRNA、shRNA-miR中的至少一种。

6.根据权利5所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于，所述多能干细胞或其衍生物来源于人类；所述小核酸分子的序列为来源于不靶向人类任何mRNA或lncRNA的非人类物种的随机序列，优选来源于秀丽隐杆线虫。

7.根据权利要求6所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述小核酸分子的序列为以下任一种：

5’-TTGTACTACACAAAAGTACTG-3’；

5’-TCACAACCTCCTAGAAAGAGTAGA-3’。

8.根据权利要求1-7任一项所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述第二核酸分子包括至少3个重复的小核酸分子序列的反向互补序列，优选为6～10个重复的小核酸分子序列的反向互补序列。

9.根据权利要求2-8任一项所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述诱导型基因表达系统包括Tet-Off系统、二聚体诱导表达系统中的至少一种。

10.根据权利要求1-9任一项所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述第一核酸分子、诱导型基因表达系统的导入位点为基因组安全位点，优选为AAVS1安全位点、eGSH安全位点、H11安全位点中的至少一种。

11.根据权利要求1-10任一项所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于，所述第一核酸分子、诱导型基因表达系统的导入采用病毒载体干扰、非病毒载体转染或者基因编辑的方法；第二核酸分子的导入采用基因编辑的方法；所述基因编辑优选为基因敲入。

12.根据权利要求1-11任一项所述的多能干细胞或其衍生物，其特征在于：所述多能干细胞包括胚胎干细胞、胚胎生殖细胞、胚胎癌细胞、或者诱导多能干细胞；

所述衍生物包括多能干细胞来源的三胚层源器官、组织或者细胞；

所述多能干细胞来源的三胚层源细胞包括间充质干细胞、神经干细胞或祖细胞，或者其他成体干细胞。

13.权利要求1-12任一项所述的多能干细胞或其衍生物在制备用于细胞治疗的产品、或用于器官移植产品中的应用。