[发明专利]一种测定羟丙基四氢吡喃三醇含量及其非对映异构体比例的方法

说明书

本发明涉及一种测定羟丙基四氢吡喃三醇含量及其非对映异构体比例的方法，其特征在于包括以下步骤：A、分别配制空白溶液、对照品溶液、待测样品溶液；B、将步骤A配制的空白溶液、对照品溶液、待测样品溶液注入液相色谱仪，设置色谱条件如下：色谱柱为酰胺键合相色谱柱，4.6×250mm，5μm；进样体积为10μl；流速为0.9‑1.0ml/min；柱温为25℃‑30℃；蒸发室、漂移管温度为40℃‑50℃；气体流速为1.6ml/min；流动相：流动相A为甲醇，流动相B为乙腈；记录色谱图。本发明具有操作简单，羟丙基四氢吡喃三醇检测限低，在线性范围内线性良好，相关系数高，能分离羟丙基四氢吡喃三醇非对映异构体并检测羟丙基四氢吡喃三醇非对映异构体比例等有益效果。

技术领域

本发明涉及日用化学品分析领域，特别涉及一种运用高效液相色谱—蒸发光散射检测器（ELSD）测定羟丙基四氢吡喃三醇含量并分离测定其非对映异构体比例的方法。

背景技术

羟丙基四氢吡喃三醇(CAS号439685-79-7)，又名玻色因，是人工化学合成的木糖衍生物，据已发表论文和专利，羟丙基四氢吡喃三醇可以促进糖胺聚糖、蛋白多糖的合成，帮助表皮与真皮紧密联结、维持真皮弹性；可以促进胶原蛋白的合成；能够促进成纤维细胞生长因子的再生，因此具有较强的抗衰老及皮肤修复作用。羟丙基四氢吡喃三醇的结构，7位手性碳原子上的羟基存在立体化学结构，以一对非对映异构体形式共存。

目前没有一个已报道的检测方法既可以测定羟丙基四氢吡喃三醇含量，又能同时分离并测定非对映异构体比例。

专利CN111189800A中提供了一种运用折光率测试确定羟丙基四氢吡喃三醇含量浓度的方法，但是该检测方法属于非直接检测，易造成假阳性的结果；同时该专利中也未说明该检测方法的灵敏度与准确度。为了解决上述问题，本发明拟提供一种直接测定羟丙基四氢吡喃三醇含量并能分离其非对映异构体的高效液相检测方法，利用对照品定量，保证了方法的灵敏度和准确度。

据Alexandre Cavezza, Christophe Boulle, Amélie Guéguiniat, PatrickPichaud, Simon Trouille, Louis Ricard, Maria Dalko-Csiba, Bioorganic Medicinal Chemistry Letters，2009，DOI：10.1016/j.bmcl.2008.12.037文献报道，羟丙基四氢吡喃三醇结构中7位手性碳原子上羟基的立体化学结构对促进糖胺聚糖的合成作用具有影响，不同的非对映异构体比例会导致不同的活性水平。非对映异构体比例70/30的羟丙基四氢吡喃三醇活性远高于非对映异构体比例为50/50。随着羟丙基四氢吡喃三醇合成工艺专利保护在2020年底即将到期，市面上已经出现许多国产羟丙基四氢吡喃三醇样品。为了评价羟丙基四氢吡喃三醇样品的优劣，亟需发展一种能高效准确的检测羟丙基四氢吡喃三醇含量，同时又能判定非对映异构体比例的检测方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，提供一种运用高效液相色谱法—ELSD测定羟丙基四氢吡喃三醇含量及其非对映异构体比例的方法。

为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：一种测定羟丙基四氢吡喃三醇含量及其非对映异构体比例的方法，其特征在于包括以下步骤：

A、分别配制空白溶液、对照品溶液、待测样品溶液，所述空白溶液为纯净水，所述对照品溶液为羟丙基四氢吡喃三醇对照品溶液；所述待测样品溶液为羟丙基四氢吡喃三醇原料配制成的不同浓度的溶液；