[发明专利]一种肉苁蓉多糖的复合酶联合超声提取工艺

说明书

本发明公开了一种肉苁蓉多糖的复合酶联合超声提取工艺，通过十八角度激光光散射仪配置示差检测器测定多糖的质量分数，以肉苁蓉多糖的得率以及质量分数为评价指标，通过单因素考查以及正交试验确定复合酶联合超声提取工艺的最适提取条件。与现有技术相比，本发明通过复合酶联合超声提取法，得到了肉苁蓉多糖的最适提取条件包括复合酶用量、复合酶配比、超声功率、超声时间、酶解温度、pH，本发明的方法提取率高，重现性好。优化后的复合酶联合超声提取工艺能够有效的增大肉苁蓉多糖的得率，是一种简单方便、经济环保的提取方法，为日后多糖的研究奠定了基础。

技术领域

本发明涉及药物提取技术领域，尤其涉及一种肉苁蓉多糖的复合酶联合超声提取工艺。

背景技术

肉苁蓉属植物为列当科多年生草本寄生植物，肉苁蓉多糖是肉苁蓉属植物最重要的活性成分之一，具有调节免疫活性、抗衰老、抗肿瘤等作用。近年来，国内外对肉苁蓉的研究逐渐深入，肉苁蓉具有具有补肾壮阳、填精益髓、润肠通便，保肝，提高记忆力等功效，多糖作为肉苁蓉的主要的成分，具有重要的研究价值，但由于提取多糖的工艺复杂，得率低，提取多糖主要的方法为热水浸提法，王晓琴，曹礼，朱艳萍.肉苁蓉多糖提取工艺及抑菌作用研究[J].安徽农业科学，2009，37(32)：15855-15856，15878.采用单因素试验和正交试验，对肉苁蓉多糖的热水浸提提取条件进行优化分析，得到最佳提取工艺为提取肉苁蓉多糖的平均得率为6.7857mg/g。但此法操作复杂，耗时长，提取率低，且长时间的加热有可能造成多糖的褐变及其他水溶性成分的溶解，导致纯度降低。目前对肉苁蓉多糖的研究有限，需要不断的改进与创新，以提高多糖的利用率。

发明内容

本发明的目的是要提供一种肉苁蓉多糖的复合酶联合超声提取工艺。

为达到上述目的，本发明是按照以下技术方案实施的：

本发明包括以下步骤：

①取荒漠肉苁蓉粉末加乙醇回流脱脂、离心处理得滤渣备用；

②取滤渣加水进行超声提取，超声提取时间为20-40分钟，超声功率为300-550W、40kHz，调节pH至4-6；

③加入复合酶，水浴恒温提取，再升温灭酶，离心处理取滤液备用；

④将滤液旋蒸后加入sevge试剂，进行振摇、离心处理，去除沉淀，取上清液备用；

⑤将步骤④得到的上清液再重复步骤④操作2次；

⑥将上清液用乙醇沉淀多糖、静置、离心得沉淀；

⑦用无水乙醇、丙酮反复冲洗沉淀；

⑧最后烘干得肉苁蓉多糖。

优选的，所述步骤①中的荒漠肉苁蓉粉末过4号筛，所述乙醇量为荒漠肉苁蓉粉末的10倍体积，所述乙醇为95％的乙醇，所述回流脱脂的时间为3h。

优选的，所述步骤②中加水量为滤渣的30倍体积，所述超声提取时间为20分钟，所述超声提取的功率为350W、40kHz，调节pH至6。

优选的，所述步骤③中复合酶加入量为步骤②中滤渣与水混合物的4％，所述水浴恒温提取温度为50℃，所述水浴恒温提取时间为2h，灭酶温度为90℃。

优选的，所述步骤④中滤液旋蒸至100mL，所述sevge试剂加入量为步骤③混合物的1/4，振摇时间为30min，离心时间为10min。

优选的，所述步骤⑥中上清液用4倍量95％乙醇沉淀多糖，静置温度为4℃，静置时间为8-10h。

优选的，所述步骤⑧烘干温度为60℃。

进一步，所述复合酶由纤维素酶和果胶酶按体积比1∶2-4混合而成，优选1∶3混合而成。