[发明专利]一种具有免疫调节作用的党参葡聚糖及制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种具有免疫调节作用的党参葡聚糖及制备方法和应用，该党参葡聚糖主链为α‑D‑吡喃葡萄糖1→4糖苷键连接而成，支链为β‑D‑吡喃葡萄6→1连接而成，且由结构单元A和结构单元B按数量比为15~17:1连接而成，该党参葡聚糖分子量为1500~2000 Da。该党参葡聚糖制备方法包括如下步骤：（1）党参总多糖的提取；（2）党参总多糖提取液乙醇醇沉；（3）党参多糖的超滤分离。该党参葡聚糖在药品、保健品、保健食品、食品领域的应用。

技术领域

本发明涉及中药活性成分制备技术领域，具体为一种具有免疫调节作用的党参葡聚糖及制备方法和应用。

背景技术

党参（Radix Codonopsis）为桔梗科党参属植物党参、素花党参及川党参的干燥根。党参具有补中益气、健脾益肺的功效，临床用于脾肺虚弱、气短心悸、食少便溏、虚喘咳嗽等症。党参主要含有多糖、三萜、炔苷、生物碱、苯丙素等成分，其中多糖含量最高，为党参重要的药理活性成分。但是，目前有关党参葡聚糖的免疫调节几乎没有相关报道。

发明内容

本发明通过对党参总多糖的超滤分离，然后进行免疫调节筛选，得到一种具有免疫调节作用的党参葡聚糖。

本发明是采用如下技术方案实现的：

一、具有免疫调节作用的党参葡聚糖，该党参葡聚糖主链为α-D-吡喃葡萄糖1→4糖苷键连接而成，支链为β-D-吡喃葡萄6→1糖苷键连接而成，且由结构单元A和结构单元B连接而成，结构单元A和结构单元B的数量比为15~17:1，该党参葡聚糖分子量为1500~2000Da。

其中，结构单元A的结构通式如下：

结构单元B的结构通式如下：

。

二、上述具有免疫调节作用的党参葡聚糖的提取分离方法，包括如下步骤：

（1）、党参总多糖提取

党参药材按料液比1:10~1:20浸泡30min，加热回流提取3次，每次1.5h，合并三次提取液。

（2）、党参多糖的醇沉

将党参多糖提取液经减压浓缩至1/4~1/3体积，采用60%~90%乙醇沉淀后，10℃以下静置12~24h，1000~1500转/分钟离心15~30min，去上清，沉淀用乙醚、乙酸乙酯、丙酮、无水乙醇依次洗涤3次，冷冻干燥，得到党参多糖样品。

（3）、党参多糖的超滤分离

将党参多糖样品用水溶解后，最终过3000分子量滤膜（例如，依次通过10000、5000、3000分子量滤膜），得到具有免疫调节作用的党参葡聚糖（CPC）。

三、针对上述制备的党参葡聚糖的结构鉴定如下：

（1）、对本发明获得的党参葡聚糖采用高效凝胶渗透色谱法进行分子量测定：

色谱条件：安捷伦1260 HPLC系统-RID检测器，分析柱为TSKgel G4000PWXL色谱柱（7.8mm×30cm，10μm），流动相为乙腈：水=70:30，流速0.5mL/min，示差检测器温度35℃，柱温35℃，进样量20μL。

（2）、对本发明获得的党参葡聚糖进行结构分析

以IR光谱、甲基化GC-MS联用、¹H-NMR、¹³C-NMR及2D-NMR分析。

上述分析证明：该葡聚糖主链为α-D-吡喃葡萄糖1→4糖苷键连接而成，支链为β-D-吡喃葡萄6→1糖苷键连接而成，且由结构单元A和结构单元B两种结构单元按数量比为15~17:1连接而成，该葡聚糖分子量为1500~2000 Da。