[发明专利]用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体及其制备方法应用

说明书

本发明公开一种用于抑制新冠病毒SARS‑CoV‑2的卵黄抗体的制备方法，如下步骤：采用基因重组法制备SARS‑CoV‑2冠状病毒的S蛋白抗原；对抗原进行乳化；免疫：选健康的产蛋母鸡隔离饲养并进行注射免疫；从上述鸡卵中提取抗体。本发明利用基因工程的方法构建含有SARS‑CoV‑2冠状病毒S蛋白的抗原表位表达质粒，在大肠杆菌中进行表达，然后分离并纯化表达产物作为抗原，与佐剂混合乳化后，免疫健康产蛋母鸡，收集鸡蛋，提取蛋黄中卵黄抗体，该抗体是天然的免疫球蛋白，可以有效地抑制和清除SARS‑CoV‑2冠状病毒。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体及其制备方法与应用。

背景技术

新冠状病毒的临床特征包括以发热、乏力、干咳为主，少数患者伴有鼻塞、流涕、腹泻等症状，潜伏期一般是1-14天之间，在潜伏期就会有传染的危险，传播形式主要包括飞沫直接传播、接触传播等。

SARS-CoV-2病毒于β属冠状病毒，病毒颗粒多呈圆形或椭圆形，有包膜，外周有冠状排列的纤突，病毒直径在60-140nm之间。其基因特征与SARSr-Cov和MERS-CoV 有明显区别。目前研究显示其序列与蝙蝠SARS样冠状病毒(bat-SL-CoVAC45)同源性达85％以上。

SARS-CoV-2冠状病毒为单链RNA病毒，全长29.903kb，具有12个ORF(Open ReadingFrames)，分别编码RNA的RNA聚合酶、4种结构蛋白(S、E、M、N蛋白)、 6种未知蛋白。SARS-CoV-2不同于以往任何一种已知的六种能够感染人类的冠状病毒，该病毒在不同的蛋白上至少有17个位点涉及氨基酸的改变，这给特异性治疗 SARS-CoV-2带来巨大困难。

截止目前，人们还没有找到很好的预防和治疗SARS-CoV-2病毒的方法。目前常用的预防SARS-CoV-2病毒的消毒剂主要有含氯消毒剂和过氧乙酸消毒剂，这些消毒剂尽管可以有效杀灭冠状病毒，但同时它们对人体有比较强烈的刺激性和腐蚀性，因此只能用于日常物品的消毒，无法对人体进行消毒保护，另外对环境造成污染。在治疗方法，基本上都是针对疾病症状的对症治疗，有较多的负作用，且不能有效的控制病毒感染。临床上采用治愈患者的血浆是治疗SARS-CoV-2最为有效的方法，可以大幅降低危重患者的病死率。这反应的采用SARS-CoV-2中和抗体可以有效治疗SARS-CoV-2引起的严重急性性呼吸综合征，但是治愈患者的血浆来源有限，且处理程序复杂，存在潜在危险，不适合广泛推广。

现有技术实现方案中，还没有抗SARS-CoV-2卵黄抗体的报道。

发明内容

发明目的：本发明目的在于针对现有技术的不足，提供一种用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体及其制备方法；

本发明的另一目的在于提供上述用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体在制备防治新冠病毒SARS-CoV-2感染的产品的应用。

技术方案：本发明所述的一种用于抑制新冠病毒SARS-CoV-2的卵黄抗体的制备方法，包括如下步骤：

(1)采用基因重组法制备SARS-CoV-2冠状病毒的S蛋白抗原；

(2)对步骤(1)中制备的抗原进行乳化：采上述抗原用弗氏完全佐剂按1:1混合后乳化作为初次免疫抗原；选用弗氏不完全佐剂与上述抗原按1:1混合后乳化作为加强免疫抗原；

(3)免疫：选健康的产蛋母鸡隔离饲养并进行鸡肌肉多点注射步骤(2)中的免疫抗原，初次免疫后，隔两周开始加强免疫，每隔一周加强免疫一次，共加强免疫三次；从初次免疫后计算，第三十天开始收集鸡卵，该鸡卵中含有抑制新冠病毒SARS-CoV-2 的卵黄抗体，将鸡卵4℃存储备用；

(4)从上述鸡卵中提取抗体。

进一步地，步骤(1)中所述S蛋白抗原的S蛋白抗原表位包括