[发明专利]紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法及应用

权利要求书

1.一种紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

a) 提供供试品溶液和参照物溶液；

参照物包括丹酚酸B和丹参酮ⅡA对照品，以及丹参、半枝莲和蛇莓对照药材；

所述供试品溶液的制备过程，包括以下步骤：

有机溶剂溶解紫龙金片，加热回流，冷却，有机溶剂补足损失的重量，滤过，得到供试品溶液；

其中，所述有机溶剂为甲醇；

b) 采用高效液相色谱法对供试品溶液和参照物溶液进行分析，构建高效液相色谱指纹图谱；

其中，所述高效液相色谱指纹图谱的条件包括：

色谱柱：Waters Symmetry C₁₈色谱柱；

柱温：20~30℃；

流动相：按体积百分数计，流动相A为0.05%~0.15%磷酸和90%乙腈溶液，流动相B为0.05%~0.15%磷酸溶液；

按体积百分数计，梯度洗脱程序为：

0~7min，A：12→17％、B：88→83％；

7~12min，A：17％、B：83％；

12~24min，A： 17→22％、B：83→78％；

24~33min，A： 22→27％、B：78→73％；

33~44min，A： 27→32％、B：73→68％；

44~51min，A： 32→77％、B：68→23％；

51~75min，A： 77→92 ％、B： 23→8％；

流速：0.75~1.0 ml/min；

检测波长：230~320nm。

2.根据权利要求1所述的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱中包括如下7个共有峰：

峰1来源于蛇莓；峰2和峰3来源于半枝莲；峰4为丹酚酸B峰；峰5和峰6来源于丹参；峰7为丹参酮ⅡA峰。

3.根据权利要求2所述的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述紫龙金片的高效液相色谱中各共有峰的相对保留时间变化范围为±5%。

4.根据权利要求3所述的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，在所述参照物的高效液相色谱指纹图谱中，以丹酚酸B为参照峰S，计算紫龙金片的各特征峰与S峰的相对保留时间，所述相对保留时间在规定值的±5 % 之内；

保留时间规定值为：

26.2-峰1、30.1-峰2、43.5-峰3、45.1-峰4(S)、63.2-峰5、63.0-峰6、69.1-峰7。

5.根据权利要求1所述的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述柱温22~28℃，流速0.80~1.0 ml/min，检测波长250~310nm。

6.根据权利要求5所述的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述柱温25℃, 流速0.90ml/min，检测波长270nm。

7.根据权利要求1所述的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，对照品溶液的制备过程，包括以下步骤：

提供含丹酚酸B和丹参酮ⅡA的对照品溶液；

其中，甲醇溶解丹酚酸B和丹参酮ⅡA。

8.根据权利要求1所述的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，对照药材溶液的制备过程，包括以下步骤：

分别提供丹参、半枝莲和蛇莓制成的干膏粉，利用有机溶剂溶解，加热回流，冷却，有机溶剂补足损失的重量，滤过，得到对照药材溶液；

其中，所述有机溶剂为甲醇。

9.根据权利要求1所述的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，构建对照品和对照药材的高效液相色谱图的过程，包括：建立对照品色谱图、建立丹参对照药材色谱图、建立丹参阴性对照色谱图、建立蛇莓药材色谱图、建立蛇莓阴性对照色谱图、建立半枝莲药材色谱图以及建立半枝莲阴性对照色谱图。

10.根据权利要求1-9任一项所述的紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法在评价紫龙金片的药品质量方面的应用。