[发明专利]一种红曲橙色素的萃取纯化方法

说明书

本发明属于生物化学技术领域，具体为一种红曲橙色素的萃取纯化方法。步骤为：A、红曲发酵液采用管式离心分离得到红曲湿菌丝体，所述离心转速10000～14000r/min，离心时间5～15mim；B、将步骤A所得的红曲湿菌丝体直接通过球磨机破壁，红曲湿菌丝体破壁程度达到50～70％时，根据湿菌丝体量，按质量比1：1加入微粉硅胶，再装入超临界二氧化碳萃取装置中萃取红曲橙色素；C、萃取结束后从分离釜中放料并收集红曲橙色素萃取物。本发明采用超临界二氧化碳萃取技术，提高了萃取率，缩短了萃取时间，红曲橙色素纯度高、提取率高。

技术领域

本发明属于生物化学技术领域，具体为一种红曲橙色素的萃取纯化方法。

背景技术

红曲色素是红曲霉代谢产物，主要由黄色素、红色素、橙色素组成。红曲色素有三种色调：橙色、黄色和红色，其中具有橙色色调的红曲色素被称为红曲橙色素。红曲橙色素色泽鲜艳，安全性好，是一种具有开发前景的天然着色剂，可用于食品、药品和精细化工等工业中。红曲橙色素也是红曲菌产生的一种主要抑菌物质，能够抑制革兰氏阳性菌以及大肠杆菌。目前报道的实验室中红曲橙色素分离纯化的方法主要有薄层层析法、柱层析法、高效液相色谱法和高速逆流色谱法等。其中薄层层析法载样量小，用于规模化制备时劳动强度大。柱层析法具有对设备依赖程度小，操作简单，但溶剂用量大，安全环保压力大。高效液相色谱法和高速逆流色谱法对大型仪器设备的依赖程度高，用于规模化制备时成本高。中国公开专利号CN201910763468.9，公开了一种红曲橙色素的分离纯化方法技术。采用柱层析分离提取红曲橙色素的方法，溶剂用量大，安全环保压力大且提取率较低。

发明内容

针对上述技术缺陷，本发明提供一种环保性好，适用于红曲橙色素的萃取纯化方法。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：一种红曲橙色素的萃取提取方法，步骤为：A、红曲发酵液采用管式离心分离得到红曲湿菌丝体，所述离心转速14000r/min，离心时间10mim；B、将步骤A所得的红曲湿菌丝体直接通过球磨机破壁，红曲湿菌丝体破壁程度达到50～70％时，再装入超临界二氧化碳萃取装置中萃取红曲橙色素，所述超临界二氧化碳萃取装置包括萃取釜和分离釜，所述萃取釜的萃取温度为45～65℃，萃取釜的萃取压力为15～40MPa；所述分离釜的温度为35～50℃，分离釜的压力为5～15MPa；所述的萃取时间为60～150min；C、萃取结束后从分离釜中放料并收集红曲橙色素萃取物。球磨机对红曲湿菌丝体产生强力剪切、冲击，碾压达到粉碎研磨和分散乳化作用，研磨后的最小粒度达到0.1微米。红曲湿菌丝体通过球磨机，破壁程度达到50～70％时，有利于红曲橙色素流出。为降低破壁后菌丝体的粘性，根据湿菌丝体量，加入微粉硅胶再装入超临界二氧化碳萃取装置中萃取红曲橙色。在超临界状态下，超临界二氧化碳溶解能力强，当饱含溶解物的二氧化碳流经分离器时，由于压力下降使得二氧化碳与萃取物迅速成为两相(气液分离)而立即分开，在一套设备中实现了红曲橙色素的萃取和分离。

进一步：在上述红曲橙色素的萃取提取方法中，所述步骤B的微粉硅胶加入量与红曲湿菌丝体质量比是3：1～1：3。所述步骤B还包括对萃取釜和分离釜分别加热至设定温度的过程；所述步骤B还包括对将二氧化碳用高压泵打入萃取釜、分离釜的过程；所述步骤B还包括设定参数稳定后泵入夹带剂的过程。所述夹带剂的用量为每克红曲菌丝体中小于5mL。所述步骤B的优选萃取釜的萃取温度为50℃，萃取釜的萃取压力为20MPa，所述分离釜的优选温度为45℃，分离釜的压力为10MPa。所述萃取时间为120min。所述夹带剂为乙醇，所述夹带剂的用量为每克红曲菌丝体中1.5ml。所述乙醇体积分数为70～100％，优选的，所述乙醇的体积分数为95％。通常在超临界二氧化碳中加入夹带剂如甲醇、乙醇、丙酮、水、烷烃等，以改善萃取效果，提高萃取效率，选用乙醇作为夹带剂能增强超临界二氧化碳的溶解力和选择性，且易回收。