[发明专利]一种异戊烯基转移酶胞外催化制备维生素K2 在审
申请号: | 202011348642.2 | 申请日: | 2020-11-26 |
公开(公告)号: | CN112375790A | 公开(公告)日: | 2021-02-19 |
发明(设计)人: | 郑之明;倪文枫;赵根海;王鹏;王丽;孙小雯;蒋春旭;张梦雪 | 申请(专利权)人: | 中国科学院合肥物质科学研究院 |
主分类号: | C12P7/66 | 分类号: | C12P7/66 |
代理公司: | 苏州翔远专利代理事务所(普通合伙) 32251 | 代理人: | 王华 |
地址: | 23000*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 戊烯 转移酶 催化 制备 维生素 base sub | ||
1.一种异戊烯基转移酶胞外催化制备维生素K2的方法,其特征在于:包括下列步骤:
步骤1:对含有NovQ表达菌株的菌液进行超声波处理,然后离心收集上清液得到细胞破碎液;
步骤2: 将第一反应底物、第二反应底物、MgCl2和细胞破碎液混合得到反应体系;所述第一反应底物为甲萘醌和甲萘醌氢醌中的至少一种,所述第二反应底物是异戊二烯焦磷酸和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸中的至少一种;
步骤3:将反应体系置于氮气气氛下,然后在20-40℃条件下进行反应,反应结束后,将反应液冻干,然后用甲醇萃取,萃取液离心后取上清液,上清液即含有纯化的维生素K2。
2.根据权利要求1所述的异戊烯基转移酶胞外催化制备维生素K2的方法,其特征在于:反应体系中,甲萘醌的浓度为0.25-0.75mM。
3.根据权利要求1所述的异戊烯基转移酶胞外催化制备维生素K2的方法,其特征在于:反应体系中,甲萘醌氢醌的浓度为0.2-1mM。
4.根据权利要求1所述的异戊烯基转移酶胞外催化制备维生素K2的方法,其特征在于:反应体系中,异戊二烯焦磷酸浓度为0.2-0.3mM。
5.根据权利要求1所述的异戊烯基转移酶胞外催化制备维生素K2的方法,其特征在于:反应体系中,牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸浓度为0.3-0.6mM。
6.根据权利要求1所述的异戊烯基转移酶胞外催化制备维生素K2的方法,其特征在于:反应体系中,MgCl2的浓度范围为2-3mM。
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