[发明专利]一种磁细胞及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种磁细胞，其特征在于，包括磁珠和细胞；

所述磁珠为被活性功能基团修饰的生物磁珠，所述被活性功能基团修饰的生物磁珠为氨基磁珠或羧基磁珠；

所述细胞为过表达抗原膜蛋白的细胞；

所述磁细胞中的磁珠直接锚定细胞，不借助抗原、抗体反应，通过磁珠的活性功能基团与细胞的膜蛋白共价偶联在一起形成所述的磁细胞；且所述磁细胞中的磁珠吸附不影响膜蛋白的免疫反应。

2.根据权利要求1所述的磁细胞，其特征在于，所述磁珠的尺寸为微米级。

3.根据权利要求2所述的磁细胞，其特征在于，所述磁珠的直径为0.2~5μm。

4.根据权利要求1所述的磁细胞，其特征在于，所述细胞是通过质粒转染使其过表达抗原膜蛋白的细胞；

所述质粒为所述抗原膜蛋白的表达质粒；

所述抗原选自NF155抗原、AQP4抗原、MOG抗原、Caspr1抗原或NF186抗原；

所述细胞为贴壁细胞。

5.权利要求1~4任一项所述的磁细胞的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

混合孵育：将活化后的磁珠与过表达抗原膜蛋白的细胞混合孵育0.5～2h。

6.根据权利要求5所述的磁细胞的制备方法，其特征在于，细胞的浓度为1×10⁶cells/ml~3×10⁶ cells/ml。

7.根据权利要求5所述的磁细胞的制备方法，其特征在于，细胞和磁珠的用量比为1×10⁶ cells/45ug beads~1×10⁶ cells/60ug beads。

8.根据权利要求5所述的磁细胞的制备方法，其特征在于，混合孵育是将活化后的羧基磁珠的MES溶液与细胞的完全培养基悬浮液混合孵育，或者，将活化后的氨基磁珠的PBS溶液与细胞的完全培养基悬浮液混合孵育；

MES溶液的pH为4.5~6.7，PBS溶液的pH为7.2~8.0；

磁珠浓度为1~10 mg/ml。

9.根据权利要求5所述的磁细胞的制备方法，其特征在于，还包括细胞过表达抗原膜蛋白步骤：将细胞通过质粒转染使其过表达抗原膜蛋白，所述质粒为所述抗原膜蛋白的表达质粒。

10.权利要求1~4任一项所述的磁细胞在检测抗细胞表面蛋白抗体中的应用。

11.一种抗细胞表面蛋白抗体的磁细胞法检测方法，其特征在于：是将权利要求1~4任一项所述的磁细胞与待测样品混合孵育后，再加入二抗孵育，通过二抗上标记的信号进行检测；

所述二抗为山羊抗人IgG。