[发明专利]WRKY32调控YFT1表达影响番茄果色及其在番茄品质改良中应用

说明书

本发明公开了WRKY32调控YFT1表达影响番茄果色及其在番茄品质改良中应用；具体涉及WRKY32通过结合于YFT1启动子区域W‑box(TTGAC，‑784bp～‑780bp)和W‑box Like(GTCTA，‑1306bp～‑1302bp)基序(定义YFT1起始密码子ATG上游第一个核苷酸为‑1bp)，调控YFT1转录表达。通过RNAi技术创制WRKY32下调表达番茄(WRKY32‑RNAi)，分析WRKY32‑RNAi番茄果实形态和化学表型，为果实乙烯释放和信号转导受抑、类胡萝卜素含量下降、有色体发育和果实软化速度延迟提供了坚实的遗传学证据。

技术领域

本发明属于分子生物学和遗传学领域，涉及一种WRKY32调控YFT1表达影响番茄果色及其在番茄品质改良中应用；特别涉及一种番茄转录因子WRKY32通过调控乙烯信号核心组分基因YFT1/EIN2(YELLOW FRUITED TOMATO 1/ETHYLENE INSENSITIVE 2)表达而控制番茄果色及其在番茄品质改良中应用。

背景技术

番茄(Solanum lycopersicum，2n＝24)属于茄科(Solanaceae)番茄属(Lycopersicon)植物，是世界上第二大蔬菜作物。番茄以其基因组小、生长周期短、易于遗传转化等优点，还是浆果研究的重要模式植物。果色不仅关系到番茄的商品外观，还与营养品质密切相关，因此果色是番茄品质性状的重要方面。市面上常见的番茄以红果和黄果为主，它们的果色形成与类胡萝卜素积累有关。而番茄类胡萝卜素生物合成途径中的每一步骤从分子水平(基因)和蛋白水平(催化酶)均已明确，对类胡萝卜素合成调控的分子机制揭示还鲜见报道。

番茄是一种典型的呼吸跃变型浆果，是具有呼吸高峰型的果实，乙烯在番茄果实成熟过程起关键作用。乙烯合成关键基因ACS(ACC SYNTHASE)和ACO(ACC OXIDASE)表达下调，番茄果实类胡萝卜素累积减少，番茄呈现橙色表型。乙烯信号转导被阻断，番茄果实成熟也将受到影响。乙烯受体基因LeETR4(ETHYLENE RESPONSE 4)、LeETR6(ETHYLENERESPONSE 6)和LeCTR1(CONSTITUTIVE TRIPLE RESPONSE 1)表达下调，可延长番茄果实成熟时间。乙烯不敏感番茄突变体Nr(Never ripe)表现难以成熟表型，番茄红素累积下降。乙烯信号途径核心转录因子LeEIL(ETHYLENE INSENSITIVE 3-like)表达下调，果实成熟延迟，呈现黄果表型。

EIN2(ETHYLENE INSENSITIVE 2)是乙烯信号途径核心组分，与乙烯受体和CTR1(CONSTITUTIVE TRIPLE RESPONSE1)互作，其羧基端(CEND)在乙烯存在情况下，可从EIN2上解离，在胞质中调控EIN3-BINDING F-BOX 1/2(EBF1/2)表达，决定后者的入核量，或入核后与EIN3/EIL1形成复合体，调控乙烯应答反应。