[发明专利]SARS-CoV-2相关多肽

说明书

本发明涉及临床检验试剂领域，具体而言，涉及一种SARS‑CoV‑2相关多肽。该多肽为具有如SEQ ID NO:1或2的氨基酸片段，可用于原核表达，制备方便，且用于检测SARS‑CoV‑2抗体时临床特异性和检出率高。

技术领域

本发明涉及临床检验试剂领域，具体而言，涉及一种SARS-CoV-2相关多肽。

背景技术

2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引发新型冠状病毒肺炎(COVID-19)。由于新冠肺炎潜伏期长、初时发病症状不明显且传播迅速，因此，实现早期临床高效检出病毒感染是全面控制病毒的一个重要方面。核酸检测被推荐为新冠肺炎的主要确诊手段，但在临床实践中，核酸检测可能受样本采集部位、采集方法、病程等因素的影响而出现假阴性结果；而且由于核酸检测对检测环境和人员的要求较高，给疾控中心和医院带来很大挑战；相比之下基于病毒结构蛋白的免疫学检测抗体抗原法具有快速、方便、安全、有效的特点，建立此方法具有重要意义，2020年3月4日国家公布的《新型冠状病毒肺炎诊疗方案(试行第七版)》将抗体检测纳入诊断标准。新冠病毒抗体检测主要为IgM和IgG，IgM产生早但维持时间短，可作为早期感染的指标，IgG产生晚但维持时间长，可作为感染和既往感染的指标。检测方法主要有化学发光免疫分析法、胶体金免疫层析法以及酶联免疫吸附测定法等。

SARS-CoV-2属于β冠状病毒属，其基因组为一长约29kb的正单链RNA，可编码至少四种病毒结构蛋白，分别为刺突蛋白(Spike,S)、膜蛋白(Membrane,M)、包膜蛋白(Envelope,E)以及核蛋白(Nucleocapsid,N)。S蛋白作为SARS-CoV-2的主要跨膜糖蛋白，与它的近亲们一样，是依赖于S蛋白完成细胞的识别和入侵。S蛋白又分成S1和S2两个亚基，S1形成了刺突蛋白的球状头，包含S蛋白的大受体结合结构域N端结构域(NTD)和受体结合结构域(RBD)，负责识别宿主细胞受体，完成病毒与细胞的结合；而S2形成了刺突蛋白的茎，参与膜融合，负责完成病毒包膜与人细胞膜的融合，完成入侵过程。而对于SARS-CoV-2而言，开发用于检测病毒特异性抗体抗原的免疫学检测方法主要是针对具有高免疫原性的结构蛋白S蛋白和N蛋白。

发明内容

本发明通过筛选，意外地获得了SARS-CoV-2病毒S蛋白区域中的SEQ ID NO:1或2所示的特定区段(实施例中称之为COVS8和COVS8B)，该区段可用于原核表达，且表达出抗原活性高，用于检测SARS-CoV-2抗体时临床特异性和检出率高。该多肽免疫原性也很好，能刺激动物体产生反应性较高的多种抗体。

COVS8的氨基酸序列：

ENGTITDAVDCALDPLSETKCTLKSFTVEKGIYQTSNFRVQPTESIVRFPNITNLCPFGEVFNATRFASVYAWNRKRISNCVADYSVLYNSASFSTFKCYGVSPTKLNDLCFTNVYADSFVIRGDEVRQIAPGQTGKIADYNYKLPDDFTGCVIAWNSNNLDSKVGGNYNYLYRLFRKSNLKPFERDISTEIYQAGSTPCNGVEGFNCYFPLQSYGFQPTNGVGYQPYRVVVLSFELLHAPATVCGPKKSTNLVKNKCVNFNFNGLTGTGVLTESNKKFLPFQQFGRDIADTTDAVRDPQTLEILDITPCSFGGVSVITPGTNTSNQVAVLYQDVNCTEVPVAIHADQLTPTWRVYSTGSNVFQTRAGCLIGAEHVNNSYECDIPIGAGICASYQTQTNSPRRARSVASQ(SEQ ID NO:1)。

COVS8B的氨基酸序列：