[发明专利]玉米与菌根真菌共生相关蛋白及其编码基因与应用在审
| 申请号: | 202011316982.7 | 申请日: | 2020-11-19 |
| 公开(公告)号: | CN114516906A | 公开(公告)日: | 2022-05-20 |
| 发明(设计)人: | 陈化榜;赵丽;刘洁 | 申请(专利权)人: | 中国科学院遗传与发育生物学研究所 |
| 主分类号: | C07K14/415 | 分类号: | C07K14/415;C12N15/29;C12N15/82;A01H6/20;A01H6/46;A01H5/06;A01H5/00 |
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| 地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 玉米 菌根 真菌 共生 相关 蛋白 及其 编码 基因 应用 | ||
1.蛋白质,是如下(a)-(c)中任一的蛋白质:
(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(b)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;
(c)将序列1或序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加,且与玉米与菌根真菌互作相关的由序列1或序列2衍生的蛋白质。
2.编码权利要求1所述蛋白质的核酸分子。
3.根据权利要求2所述的核酸分子,其特征在于:所述核酸分子为编码权利要求1所述蛋白质的基因,所述基因为如下1)-5)中任一的DNA分子:
1)序列表中序列3所示的DNA分子;
2)序列表中序列4所示的DNA分子;
3)序列表中序列7的第21-1553位所示的DNA分子;
4)在严格条件下与1)-3)中任一限定的DNA分子杂交且编码玉米与菌根真菌共生相关的由序列1或序列2衍生的蛋白质的DNA分子;
5)与1)-4)中任一限定的DNA序列具有90%以上同一性,且编码玉米与菌根真菌共生相关的由序列1或序列2衍生的蛋白质的DNA分子。
4.含有权利要求2或3所述核酸分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组微生物。
5.根据权利要求4所述的重组载体,其特征在于:所述重组载体为重组表达载体或重组克隆载体。
6.权利要求1所述蛋白质或权利要求2或3所述核酸分子或权利要求4或5所述的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组微生物在如下任一中的应用:
(a)植物育种和/或制种;
(b)调控植物与菌根真菌共生并形成菌根结构的能力;
(c)调控植物抗逆能力。
7.培育转基因植物的方法,为如下(A)或(B)或(C)或(D):
本发明所提供培育转基因植物的方法,可为如下:
(A)培育能够形成菌根结构的转基因植物的方法,包括如下步骤:
(a1)向不能形成菌根结构的受体植物中导入权利要求1所述蛋白质的编码基因,得到表达所述编码基因的转基因植物;
(a2)从步骤(a1)所得转基因植物中得到能够形成菌根结构的转基因植物;
(B)培育不能形成菌根结构的转基因植物的方法,包括如下步骤:
(b1)抑制可形成菌根结构的受体植物中权利要求1所述蛋白质的表达,得到转基因植物;
(b2)从步骤(b1)所得转基因植物中得到不能形成菌根结构的转基因植物;
(C)培育耐盐能力增强的转基因植物的方法,包括如下步骤:
(c1)向受体植物中导入权利要求1所述蛋白质的编码基因,得到表达所述编码基因的转基因植物;
(c2)从步骤(c1)所得转基因植物中得到耐盐能力增强的转基因植物;
(D)培育角果正常生长的转基因植物的方法,包括如下步骤:
(d1)向角果不能正常生长的受体植物中导入权利要求1所述蛋白质的编码基因,得到表达所述编码基因的转基因植物;
(d2)从步骤(d1)所得转基因植物中得到能够形成正常角果的转基因植物。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:
步骤(a1)中,所述编码基因是通过权利要求5中的所述重组表达载体导入所述受体植物的;
步骤(b1)中,是通过如下实现抑制所述受体植物中所述编码基因的表达的:采用CRISPR/Cas9核酸酶对所述受体植物中权利要求1所述蛋白质的基因组DNA序列进行特异性剪切,使所述受体植物丧失或降低表达有功能的权利要求1所述蛋白质的能力;
步骤(c1)中,所述编码基因是通过权利要求5中的所述重组表达载体导入所述受体植物的;
步骤(d1)中,所述编码基因是通过权利要求5中的所述重组表达载体导入所述受体植物的。
9.根据权利要求6-8所述的应用或方法,其特征在于:所述植物为单子叶植物或双子叶植物。
10.根据权利要求6-9所述的应用或方法,其特征在于:所述单子叶植物为禾本科植物,所述双子叶植物为十字花科植物;
所述禾本科植物具体为玉米,所述十字花科植物具体为拟南芥。
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