[发明专利]澳洲坚果过敏原Vicilin特异性纳米抗体及其应用

说明书

本发明提供了一种澳洲坚果过敏原Vicilin特异性纳米抗体及其应用，所述的特异性纳米抗体为纳米抗体Nb58、纳米抗体Nb68、纳米抗体Nb81、纳米抗体Nb135、纳米抗体Nb139或纳米抗体Nb181中的至少一种。本发明所述的一种澳洲坚果过敏原Vicilin特异性纳米抗体制备周期短，成本低，稳定性高，可用于免疫检测体系的构建。

技术领域

本发明属于免疫检测领域，尤其是涉及一种澳洲坚果过敏原Vicilin特异性纳米抗体及其应用。

背景技术

传统食物过敏原组分的免疫检测技术开发基于单克隆或多克隆抗体的筛选与制备，其要求在动物免疫过程中注射高纯度过敏原蛋白，并且筛选和制备抗体周期较长。在驼源动物外周血液中天然存在一种重链抗体(Heavy Chain only Antibodies,HCAbs)，与传统单克隆抗体相比，重链抗体天然缺失轻链及重链第一恒定区(CH1)。克隆并表达重链抗体的重链可变区得到重链抗体的抗原识别和结合域，称为纳米抗体(Nanobody,Nb)。纳米抗体具有与原重链抗体相当的结构稳定性及抗原结合活性，是目前已知的可结合靶向抗原的最小抗体单位。传统免疫过程需要制备高纯度过敏原蛋白，并且传统单克隆抗体制备周期长，成本高，与传统单克隆抗体片段相比，纳米抗体存在诸多优势。纳米抗体可溶性极高，不易发生聚集沉淀，具有很高的稳定性，能够在高温、强酸、强碱等致变性条件下保持抗原结合活性，适合于原核及真核表达系统。目前，纳米抗体被广泛应用于开发治疗性抗体药物、诊断试剂(胶体金法、酶联免疫吸附法、电化学发光法)、亲和纯化基质、免疫学研究等基础科学研究领域。

发明内容

有鉴于此，本发明旨在克服现有技术中的缺陷，提出一种澳洲坚果过敏原Vicilin特异性纳米抗体及其应用。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

一种澳洲坚果过敏原Vicilin特异性纳米抗体，所述的特异性纳米抗体为纳米抗体Nb58、纳米抗体Nb68、纳米抗体Nb81、纳米抗体Nb135、纳米抗体Nb139或纳米抗体Nb181中的至少一种。

进一步，所述的特异性纳米抗体包括4个框架区FR1、FR2、FR3、FR4和3个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3；

对于纳米抗体Nb58：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示；

对于纳米抗体Nb68：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示；

对于纳米抗体Nb81：FR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示，所述的FR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.16所示，所述的FR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.17所示，所述的FR4的氨基酸序列如SEQ ID NO.18所示，所述的CDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO.19所示，所述的CDR2的氨基酸序列如SEQ ID NO.20所示，所述的CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.21所示；