[发明专利]基因工程菌及其应用在审
| 申请号： | 202011311016.6 | 申请日： | 2020-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN114517175A | 公开（公告）日： | 2022-05-20 |
| 发明（设计）人： | 陈少欣;张海霞;张正玉;吴远杰;杨松柏;卫腾云;谢亚茹 | 申请（专利权）人： | 上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12P17/08;C12R1/465 |
| 代理公司： | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人： | 王卫彬;黄益澍 |
| 地址： | 200040 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基因工程 及其 应用 | ||
1.一种生产交沙霉素的基因工程菌，其特征是，所述基因工程菌为过表达聚酮合成延长单位及修饰相关的基因的那波链霉菌交沙霉素变种(Streptomyces narbonensissubsp.josamyceticus)；
所述聚酮合成延长单位及修饰相关的基因包括：如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的第9474-10607位和/或如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的第65176-66387位。
2.如权利要求1所述的基因工程菌，其特征是，所述聚酮合成延长单位及修饰相关的基因还包括：如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的第16425-17633位和第64467-65132位。
3.如权利要求2所述的基因工程菌，其特征是，所述聚酮合成延长单位及修饰相关的基因还包括：如SEQ ID NO:1所示核苷酸序列的第1-1125位、第1118-1447位、第1444-2328位以及第18055-19116位。
4.如权利要求3所述的基因工程菌，其特征是，所述基因工程菌含有包含32个基因开放阅读框(ORF)的生物合成基因簇，具体如下：1)聚酮合酶基因ORF18-24；
2)与聚酮合成延长单位及修饰相关的基因ORF1-3、9、16-17、28-29；
3)与糖基合成相关基因ORF5-6、11-13、15、31和36；
4)与糖基转移相关基因ORF4、14、25-27；
5)与抗性相关基因ORF30；
6)与生物合成调控相关基因ORF7-8、33。
5.如权利要求4所述的基因工程菌，其特征是，所述ORF18的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第19380-32426位所示；所述ORF19的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第32476-38571位所示；所述ORF20的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第38698-43422位所示；所述ORF21的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第43419-50345位所示；所述ORF22的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第50404-55056位所示；所述ORF23的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第55107-56834位所示；所述ORF24的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第56828-60940位所示；
所述ORF1的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第1-1125位所示；所述ORF2的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第1118-1447位所示；所述ORF3的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第1444-2328位所示；所述ORF9的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第9474-10607位所示；所述ORF16的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第16425-17633位所示；所述ORF17的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第18055-19116位所示；所述ORF28的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第64467-65132位所示；所述ORF29的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第65176-66387位所示；
所述ORF5的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第3984-4595位所示；所述ORF6的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第4648-5730位所示；所述ORF11的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第11246-12676位所示；所述ORF12的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第12758-13789位所示；所述ORF13的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第13773-14651位所示；所述ORF15的核苷酸序列如SEQ IDNO:1中第15835-16434位所示；所述ORF31的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第68653-69633位所示；所述ORF36的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第72469-73032位所示；
所述ORF4的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第2555-3874位所示；所述ORF14的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第14678-15838位所示；所述ORF25的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第60940-61653位所示；所述ORF26的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第61818-63041位所示；所述ORF27的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第63120-64394位所示；
所述ORF30的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第66563-68221位所示；
所述ORF7的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第5902-7854位所示；所述ORF8的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第7908-9080位所示；所述ORF33的核苷酸序列如SEQ ID NO:1中第70070-70618位所示。
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