[发明专利]一种双抗体夹心法检测新型冠状病毒的胶体金试剂盒及制备方法

说明书

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种双抗体夹心法检测新型冠状病毒的胶体金试剂盒及制备方法。所述试剂盒包括盒体、位于所述盒体内的底板，所述底板上延长度方向依次粘贴有样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，所述硝酸纤维素膜上靠近所述胶体金结合垫侧设有检测T线，所述硝酸纤维素膜上靠近所述吸水垫侧设有质控C线，所述胶体金结合垫含有S‑RBD蛋白抗原，所述检测T线上包被有兔抗人IgG抗体，所述质控C线上包被羊抗兔IgG。该系列产品为更快捷、更准确、更早期、更便利检测新冠病毒提供更多工具，为全球抗击疫情的战役提供交叉科学的武器。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种双抗体夹心法检测新型冠状病毒的胶体金试剂盒及制备方法。

背景技术

新型冠状病毒(2019-nCoV)感染后常见体征有发热、干咳、乏力、逐渐出现呼吸困难，而部分患者未表现出临床症状。潜伏期及无症状感染者均具有传染性，且具备人传人的特点，而无症状感染者也可成为传染源，其主要通过呼吸道飞沫和密切接触传染传播，人群普遍易感。

新型冠状病毒(2019-nCoV)感染暴发以来，目前临床诊断是通过实时定量荧光PCR核酸检测试剂(核酸检测)检测患者和疑似患者血液中的2019-nCoV特定核酸序列，虽然该方法在排查中发挥了重要作用，但是该方法受操作繁琐、耗时长、需要集中送检、对检测人员要求高等的限制，同时检测结果受RNA提取效果影响较大，假阴性较高。该方法检测结果还会受到PCR试剂的质量和气溶胶污染的影响。市场上检测试剂盒目前为抗体检测试剂盒，其仅在发病产生抗体 (感染8-15天)后才能检出，不能在感染早期检测出来，因此还不能满足大规模疑似患者和无症状感染者的快速筛查。

疫情发展至今，国内疫情已较为稳定，国外疫情较为严重，目前境外输入控制极为重要，如何在机场这种人流量很大的场所快速筛查疑似病例，供临床医生快速判断是否为新型冠状病毒肺炎，以便于快速隔离免于传染给更多的人，是亟需解决的问题。

发明内容

本发明的目的是解决上述现有技术的不足，提供一种双抗体夹心法检测新型冠状病毒的胶体金试剂盒及制备方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种双抗体夹心法检测新型冠状病毒的胶体金试剂盒，包括盒体、位于所述盒体内的底板，所述底板上延长度方向依次粘贴有样品垫、胶体金结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，所述硝酸纤维素膜上靠近所述胶体金结合垫侧设有检测T 线，所述硝酸纤维素膜上靠近所述吸水垫侧设有质控C线，所述胶体金结合垫含有S-RBD蛋白抗原，所述检测T线上包被有兔抗人IgG抗体，所述质控C线上包被羊抗兔IgG。

上述双抗体夹心法检测新型冠状病毒的胶体金试剂盒的制备方法，包括以下步骤：

S1、胶体金结合垫的制备：将结合垫使用预处理液处理干燥后均匀滴加胶体金免疫复合物，37℃烘箱放置，彻底干燥后备用；

S2、硝酸纤维素膜的制备：将兔抗人IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上形成检测T线，将羊抗兔IgG包被在硝酸纤维素膜上形成质控C线；

S3、切割装配：将硝酸纤维素膜固定在底板中部，处理过的胶体金结合垫的一端压在硝酸纤维素膜的检测T线端，处理过的样品垫一端压于胶体金结合垫的另一端，将吸水垫粘在底板上，其中一端压于硝酸纤维素膜的质控C线端，将装配好的试纸条检测片用切条机切成4mm±0.5mm宽，放入卡扣底座的凹槽里，盖上盖压紧，成品置于铝箔袋中，加入干燥剂，抽真空，干燥环境保存备用。

优选地，步骤S1所述预处理液为含有0.5％PVA、50mmol/L PBS、0.5％BSA、 0.88％NaCl，pH7.4的多聚酯纤维素膜预处理液。

进一步地，步骤S1所述胶体金免疫复合物的制备方法包括以下步骤：