[发明专利]前列腺癌的风险评估装置

权利要求书

1.一种前列腺癌的风险评估装置，其特征在于，包括：

收集装置，用于收集测试者的外泌体溶液；

核酸获取装置，用于提取所述外泌体溶液的RNA，得到样品RNA溶液；

扩增装置，用于定量检测所述样品RNA溶液中所述目标区域，所述目标区域包括PCA3基因、ERG基因以及SPDEF基因；

数据获取及分析装置，用于获取PCA3基因、ERG基因以及SPDEF基因的表达量，并计算出PCA3基因和ERG基因相对SPDEF基因的表达量，

其中，所述数据获取及分析装置通过记录PCA3基因、ERG基因及SPDEF基因的Ct值，将PCA3基因和ERG基因的表达水平归一化至SPDEF基因，分别计算得到PCA3基因和ERG基因的ΔCT值，利用相对表达量的计算公式ΔΔCT＝2^ΔCt(PCA3)+2^ΔCt(ERG)，计算出PCA3基因和ERG基因的相对表达量之和，再利用公式：(16.92-ΔΔCt)*1.83，计算出一分数，该分数能反映发生前列腺癌的风险级别。

2.根据权利要求1所述的前列腺癌的风险评估装置，其特征在于，所述扩增装置包括qRT-PCR扩增体系。

3.根据权利要求2所述的前列腺癌的风险评估装置，其特征在于，所述核酸提取装置提取所述外泌体溶液中的所述样品RNA溶液的方法包括：

向所述外泌体溶液中加入600～800μl Trizol溶液，18-25℃下孵育匀浆3～5min后，加入100～220μl氯仿，晃动混匀10～20s，在2～6℃、10000～12000rpm离心10～15min，取上层澄清溶液，将上层澄清溶液进行RNA纯化，得到样品RNA溶液。

4.根据权利要求2所述的前列腺癌的风险评估装置，其特征在于，所述扩增装置对所述样品RNA溶液的扩增方法包括：

将样品RNA溶液加入qRT-PCR扩增体系中，先在30℃～50℃条件下，扩增10min～30min，再在90℃～95℃条件下，扩增2min～10min；

进一步在90℃～95℃条件下，扩增10s～30s，最后在55℃～65℃条件下，扩增30s～60s，此步骤循环30次～50次，得到PCR产物；

其中，在55℃～65℃扩增的步骤采集荧光信号。

5.根据权利要求2所述的前列腺癌的风险评估装置，其特征在于，所述qRT-PCR扩增体系包括引物混合液、PCR缓冲液、PCR反应液和酶混液。

6.根据权利要求5所述的前列腺癌的风险评估装置，其特征在于，按浓度计算，所述引物混合液包括：100nM～500nM的ERG F、100nM～500nM的ERG R、100nM～500nM的ERG Pb、100nM～500nM的SPDEF F、100nM～500nM的SPDEF R、100nM～500nM的SPDEF R、100nM～500nM的SPDEF Pb、100nM～500nM的PCA3 F、100nM～500nM的PCA3 R、100nM～500nM的PCA3Pb、0.1～10ROX和余量的水。

7.根据权利要求5所述的前列腺癌的风险评估装置，其特征在于，所述PCR缓冲液包括浓度为50mM～800mM PH值为7.5～9.0的Tris-HCl溶液、浓度为50mM～800mM的KCl、浓度为50mM～500mM的硫酸铵和余量水。

8.根据权利要求5所述的前列腺癌的风险评估装置，其特征在于，所述PCR反应液包括1～10PCR缓冲液、1mM～6mM的MgCl₂、重量百分比为0.5％～5％的甘油、0.1～1PC300和余量的水。

9.根据权利要求5所述的前列腺癌的风险评估装置，其特征在于，所述酶混液包括浓度为1U～10U的Taq-HS、浓度为1U～50U的RTase、Taq Buffer、0.1mM～1mMdNTPs、0.1～10PC300和余量的水。

10.根据权利要求1所述的前列腺癌的风险评估装置，其特征在于，所述收集装置还用于对所述外泌体溶液进行前处理，所述前处理包括提纯所述外泌体溶液。