[发明专利]一种当归六黄汤全成分的分析方法

权利要求书

1.一种当归六黄汤全成分的分析方法，其特征在于，所述分析方法采用UPLC-Q-TOF-MS方法对当归六黄汤进行分析；其中，所述高效液相色谱条件为：以十八烷基键合硅胶为填充剂，柱长150-250mm，柱内径2.1-4.6mm，填料粒径1.8-5.0um；流动相流速0.2-1mL/min；进样量2-5uL；流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为含0.1%（v/v）甲酸水溶液，流动相B为甲醇，采用如下梯度洗脱程序：0-10min，A相90%-65%，B相10%-35%；15-25min，A相65%-50%，B相35%-50%；25-35min，A相50%-35%，B相50%-65%；35-45min，A相35%-20%，B相65%-80%；45-55min，A相20%-10%，B相80%-90%；55-60min，A相10%-5%，B相90%-95%；60-65min，A相5%，B相95%；所述四级杆飞行时间质谱的条件为：采用电喷雾正、负离子模式，全扫描质荷比范围100~ 3000，干燥气温度300-500℃，干燥气流速5-15L/min，雾化气压力35-75psi，毛细管电压3000-5000V，毛细管出口电压100-200V，碰撞能量10-60V；所述当归六黄汤样品由当归、生地黄、熟地黄、黄柏、黄连、黄芩、黄芪7种饮片煎煮、浓缩、冻干后，用50%甲醇提取制得。

2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述色谱柱的柱长为250mm，柱内径为4.6mm，粒径为5um；所述流动相流速为1mL/min；所述进样量为2uL；所述色谱柱的柱温为25℃。

3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述全扫描质荷比范围100~3000，干燥气温度350℃，干燥气流速12L/min，雾化气压力为50psi，毛细管出口电压170V，碰撞能量30V。

4.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，采用电喷雾正离子模式时，喷雾电压为4000V；采用电喷雾负离子模式时，喷雾电压为-3500V。

5.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述分析方法同时对所述当归六黄汤中的68种成分进行定性检测，所述68种成分分别为L-精氨酸、水苏糖、甘露三糖、麦芽糖、奎宁酸、N-(1-deoxy-D-fructos-1-yl) pyroglutamic acid、柠檬酸、梓醇、腺苷、鸟苷、丹参素、oblongine、黄柏碱、木兰花碱、绿原酸、4-O-阿魏酰奎宁酸、N-methylhigenamine-7-O-glucopymnoside、隐绿原酸、N-甲基紫堇定碱、咖啡酸、5-O-阿魏酰奎宁酸、5-羟基小檗碱、3-O-阿魏酰奎宁酸、小檗红碱、去亚甲基小檗碱、黄连碱、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、阿魏酸、毛蕊花糖苷、格兰地新、白杨素-6-C-α-L-阿拉伯糖-8-C-β-D-葡萄糖、小檗碱、巴马汀、野黄芩苷、环五（异）亮氨酸、白杨素-6-C-β-D-葡萄糖-8-C-α-L-阿拉伯糖、异毛蕊花糖苷、环六（异）亮氨酸、芒柄花苷、5，7，2'-三羟基-6-甲氧基黄酮-7-O-葡萄糖醛酸苷、5，7，8-三羟基黄酮-7-O-葡萄糖苷、黄芩素-7-O-β-D吡喃葡萄糖苷、环七（异）亮氨酸、黄芩苷、5，7，8-三羟基-6-甲氧基黄酮-7-O-葡萄糖醛酸苷、羟基千层纸素A-9-O-葡萄糖醛酸苷、去甲汉黄芩素-7-O-葡萄糖醛酸苷、白杨素-7-O-葡萄糖醛酸苷、二氢千层纸素A-7-O-葡萄糖醛酸苷、羟基汉黄芩苷、千层纸素A-7-O-葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、5，7-二羟基-6，8-二甲氧基黄酮-7-O-葡萄糖醛酸苷、Methylnissolin、4-羟基汉黄芩素、黄芩素、芒柄花素、黄芩新素Ⅱ、汉黄芩素、藁本内酯、华良姜素、藁本内酯A、千层纸素A、黄芪甲苷和亚油酸。

6.根据权利要求6所述的分析方法，其特征在于，所述分析方法还采用相同的UPLC-Q-TOF-MS方法对黄芩苷、汉黄芩苷、小檗碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、黄柏碱、黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、绿原酸、藁本内酯、毛蕊花糖苷、黄芩素、汉黄芩素15种化学成分对照品进行检测分析，以验证所述当归六黄汤分析结果的准确性和可靠性。