[发明专利]构建用于筛查乳粉中化学危害物的液质数据库的方法

说明书

本发明涉及一种构建用于筛查乳粉中化学危害物的液质数据库的方法，所述方法包括如下步骤：(1)基粉/乳粉的前处理；(2)使用液相色谱‑级联质谱(LC‑MS)对乳粉成分进行检测并收集质谱数据；(3)数据采集与处理。

技术领域

本发明属于化学分析领域，具体而言，涉及一种构建用于筛查乳粉中化学危害物的液质数据库的方法。

背景技术

作为母乳的替代品，婴幼儿配方乳粉的质量安全一直是各个国家重点监控的领域。由于诸多因素，我国婴幼儿的母乳喂养率远低于世界卫生组织(WHO)要求的水平，食用配方乳粉婴幼儿人群的数量巨大，一旦婴幼儿配方乳粉出现能导致严重食源性危害的因素，其造成的公众影响和社会负面效应将会极其严重。其次，婴幼儿配方奶粉以婴幼儿为目标人群，该人群相比一般人群具有明显的区别特征：年龄幼小，机体机能不完善，生长发育旺盛。而这些特点也导致他们对一些物理化学和生物的危害尤为敏感。以化学性危害为例，如果配方奶粉中含有抗生素和激素等违禁物质，这对于婴幼儿脆弱的免疫系统和敏感的内分泌系统而言极具风险。

对婴幼儿配方乳粉中风险因子的筛查检测凸显紧迫和必要，通过技术层面的控制强化婴幼儿配方乳粉的产品质量安全体系保证，对于公众信心、公共安全、产业发展乃至国家利益都至关重要。

《婴幼儿配方乳粉生产许可审查细则(2013版)》规定，以牛乳或者羊乳及其加工制品为主要原料，加入部分或不加入营养素和其他辅料，通过湿法工艺生产的婴幼儿配方乳粉的半成品为基粉。通过构建的“基粉”液质基础数据库，组合多维度信息进行深度挖掘技术，构建婴幼儿配方乳粉中化学危害物的快速筛查及风险分析方法能够很好的解决上述问题。

发明内容

本发明首先涉及一种构建用于筛查乳粉/基粉中化学危害物的液质数据库的方法，所述方法包括如下步骤：

(1)50种基粉/乳粉的前处理；

(2)使用液相色谱-级联质谱(LC-MS)对乳粉成分进行检测并收集质谱数据；

(3)数据采集与处理；

所述的50种基粉是指以牛乳或者羊乳及其加工制品为主要原料，加入部分或不加入营养素和其他辅料，通过湿法工艺生产的婴幼儿配方乳粉的半成品。

步骤(1)所述的50种基粉/乳粉前处理步骤包括：

1)精密称取乳粉，加入去离子水充分搅拌至完全溶解，配制混合乳液，放置4℃保存；优选的，每克乳粉加入125ml去离子水配制混合乳液；

2)混合乳液中加入冰乙腈，涡旋振荡后，离心(8000g，5min)后取上清溶液，上清液脱脂处理；优选的，混合乳液和冰乙腈的体积比为1：3，提取的上清液的量为混合液的1/5～1/4，脱脂处理的方法为使用除脂萃取管进行脱脂；

3)提取上清液后剩余液体中加入MgSO4和NaCl，涡旋振荡混匀后，进行盐析，离心(5000g，3min)后取上清溶液；优选的，MgSO₄的加入量为剩余液体量的1/7～1/6(质量比)；NaCl的加入量为剩余液体的1/35～1/30；取上清液的量约为盐析后溶液体积的1/4～1/3；

4)步骤3)的上清液与步骤2)中的脱脂上清液混合后，涡旋振荡混匀，离心(5000g，3min)取上清液，氮气流吹干后，用甲醇/水(1:1，v/v)复溶，至滤器中过滤；优选的，提取的上清液的量为混合液的1/3～1/2，氮气吹干时的温度为40℃，所述的过滤器为Mini-UniPrep非针头式滤器。

步骤(2)所述的液相色谱-质谱联用法对乳粉成分进行检测的步骤为；

1)液相色谱的方法为：

色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18柱；

流动相：