[发明专利]一种稳定易保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液

说明书

本发明公开了一种操作简便，染色效果清晰，检出率高且不易出现沉淀，体系稳定易于保存的阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液，包含A液、B液两种试剂。A液中的荧光素可以高亲和力地与真菌细胞壁上的β‑多糖，如几丁质与纤维素等结合，标记样品中存在的真菌成分。B液由水、荧光素以及荧光助剂组成，荧光素能荧光标记阴道分泌物中的细胞以及病原微生物。试剂分别添加了防干扰荧光助剂，可提高荧光染料与细胞以及微生物的结合率，荧光强度增强，细胞微生物轮廓清晰可见同时提高染色液组分体系的稳定性，降低染液荧光淬灭风险。此染色液操作简单快捷，背景干净，图像清晰，易于判断，临床使用可大大提高阴道炎等妇科白带检测项目的准确率。

技术领域

本发明属于医学诊断技术领域，具体涉及一种阴道分泌物微生物细胞荧光检测染液。

技术背景

阴道炎是不同病因引起的多种阴道粘膜炎性疾病的总称。在正常生理状态，阴道的组织解剖学及生物化学特点足以防御外界微生物的侵袭。如果遭到破坏，则病原菌即可趁机而入，借种种因素，导致阴道炎症。

阴道炎是妇产科患者最常见疾病，分特异性和非特异性阴道炎，大多是由加德纳菌、真菌、滴虫感染引起的细菌性阴道炎、霉菌性阴道炎、滴虫性阴道炎。细菌性阴道炎是育龄妇女最常见的阴道炎类型之一，因为阴道中的乳酸杆菌被高浓度厌氧菌(如普雷沃菌、动弯杆菌)、加德纳菌、流感嗜血杆菌、球菌和支原体等病原菌所代替。细菌性阴道炎主要通过性传播途径感染，但性传播途径不是细菌性阴道炎的唯一感染方式，因为健康女性阴道内也可检出上述病原菌。细菌性阴道炎的其他危险因素包括阴道内窥镜和过早怀孕等。阴道炎的症状缺乏特异性，因此在缺乏实验室确诊依据时，依据患者主诉和其他检查难以确诊。多数阴道炎患者即使反复感染，依然无法确认发病原因，且阴道炎患者多为混合感染，因此阴道炎的确诊十分困难。

细菌性阴道炎是育龄妇女最常见的阴道炎类型之一，因为阴道中的乳酸杆菌被高浓度厌氧菌(如普雷沃菌、动弯杆菌)、加德纳菌、流感嗜血杆菌、球菌和支原体等病原菌所代替。细菌性阴道炎主要通过性传播途径感染，但性传播途径不是细菌性阴道炎的唯一感染方式，因为健康女性阴道内也可检出上述病原菌。

细菌性阴道炎(BV)是一种由阴道加德纳菌和一些厌氧菌的混合感染，导致阴道内微生态平衡失调，引起的阴道分泌物增多，白带有鱼腥臭味及外阴瘙痒灼热的综合征。

念珠菌性阴道炎(monilialvaginitis)又称外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)、霉菌性阴道炎，是由假丝酵母菌(俗称“霉菌”)引起的常见外阴阴道炎症，主要症状为外阴瘙痒、灼热痛、阴道分泌物增多、呈豆腐渣状或凝乳样。如果没有及时进行正规、彻底的治疗，患者容易反复发作，严重影响日常生活和身心健康。

滴虫性阴道炎(TV)是由毛滴虫引起，寄生人体的毛滴虫有阴道毛滴虫、人毛滴虫和口腔毛滴虫，分别寄生于泌尿生殖系统、肠道和口腔，与皮肤病有关的是阴道毛滴虫，引起滴虫性阴道炎，是一种主要通过性交传播的寄生虫疾病，具有传染性。滴虫性阴道炎表现为外阴瘙痒、分泌物增多，其特点是泡沫样的黄色白带，诊断需要进行专门的检测，和其他阴道炎进行鉴别。

传统的阴道炎诊断方法主要依赖于患者主诉、阴道检查以及实验室检查。目前临床主要检测方法有传统湿片法、革兰氏染色、酶化学法、培养法以及PCR法。

(1)传统湿片法：生理盐水稀释后涂片观察，湿片法方便经济，可在几分钟内完成，但是线索细胞的观察需要经验，背景复杂，易漏检，整体阳性检出率低且没办法检查失活的滴虫。

(2)革兰氏染色：细胞和微生物可以上色，染色后形态较湿片清晰，但滴虫会破碎，且背景也相对复杂，容易漏检或误检。

(3)酶化学方法：可搭配全自动化设备，自动化程度高，但酶的干扰因素多，无国际权威报道支持，临床符合率低，假阳性假阴性概率高，另外操作复杂，需要45分钟，37℃温育，冷链运输。