[发明专利]一种双孢蘑菇液体菌种还原菌种及其栽培方法

权利要求书

1.一种双孢蘑菇液体菌种还原菌种栽培方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、母种的制备：选取双孢蘑菇二次发酵料干料50g，琼脂条15g，纯净水1L，将双孢蘑菇二次发酵料干料放置进纯净水中煮20min，煮至完成后使用4层纱布进行过滤，得到浸液，将琼脂条投入得到的浸液内，继续加热，加热过程中不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦，待琼脂条完全融化后再将其分装到三角瓶内进行121℃,30min灭菌，灭菌完成后进行倒平板，冷却后接种，25℃培养15d；

S2、液体菌种的制备：

液体培养基配方为豆粕粉2g，玉米粉2g，蔗糖20g，KH₂PO₄ 1g，MgSO₄ 1g，水1L；称取蔗糖20g，KH₂P0₄ 1g，MgSO₄ 0.5g，纯净水1L进行加热溶解，按照配方2g黄豆粉和2g玉米粉按配方加入500mL三角瓶中，待溶解后，分装250mL在500mL的三角中进行121℃,30min灭菌，冷却后，将S1中培养好的母种接种3mm大小的菌块8-10块到液体培养基中。将接种好的液体菌种，通过磁力搅拌器对其进行搅拌，温度设置为25℃，转速设置为1200r/min搅拌0.5-2h，搅拌完成后，待接种的母种菌块被打碎后，并将三角瓶放置在摇床上，温度设置为25℃，转速设置为150r/min培养12d得到液体菌种，将得到液体菌种进行按照配方豆粕粉2g，玉米粉2g，蔗糖20g，KH₂PO₄ 1g，MgSO₄ 1g，水1L进行发酵罐发酵，发酵得到的液体菌种备用；

S3、菌丝体处理及接种栽培料：将通过步骤S1与步骤S2中制备出的菌液菌种通过布氏漏斗进行抽滤，直至漏斗下方不再滴水为止，得到菌丝体，将步骤S3中的菌丝体与无菌水缓冲液(1/0％的KH₂P0₄溶液)按照体积比1:30进行冲洗，直至漏斗下方不再滴水为止，冲洗得到的菌丝体放置进温度4℃的冰箱备用，处理完成的菌丝体与无菌水缓冲液按照质量体积比1:20配比，并用匀浆仪打碎，将打成均质的菌丝体，均匀撒在栽培料表面，进行发菌管理及出菇。