[发明专利]一种碱性磷酸酶标记AMH抗体结合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及医疗诊断技术领域，公开了一种碱性磷酸酶标记AMH抗体结合物及其制备方法和应用。本发明所述碱性磷酸酶标记AMH抗体结合物具备式I所示结构。本发明所述碱性磷酸酶标记AMH抗体结合物通过Traut’s Reagent和Sulfo‑SMCC为“桥梁”将碱性磷酸酶和AMH抗体连接在一起，所获的酶标抗体在37℃加速试验条件下的稳定性更高，在放置10天后，发光值偏差控制在5％以内，可应用于AMH的化学发光免疫分析法的试剂盒中；

技术领域

本发明涉及医疗诊断技术领域，具体的说是涉及一种碱性磷酸酶标记AMH抗体结合物及其制备方法和应用。

背景技术

目前认为抗缪勒氏管激素(AMH)是评估卵巢储备功能的最好的指标之一，而女性卵巢储备功能的检测可以对女性生育能力进行评估。AMH对多囊卵巢综合征(PCOS)、卵巢早衰、儿童性发育异常的诊断、辅助生殖技术(ART)中的应用中有重要意义。

目前对AMH检测常用方法有酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbentassay，ELISA)、化学发光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay，CLIA)，CLIA法较ELISA法检测更为快速，且灵敏度、线性、稳定性更好。

在专利CN109444437A中，基于一种还原方法标记发光指示物的缪勒氏管激素测定试剂盒，其具有极佳的稳定性，37℃下8天的稳定性，测试浓度分别为20ng/mL，0.8ng/mL，发光值总体分别下降了6.2％，10.1％。然而在抗缪勒氏管激素化学发光检测试剂盒中，追求更佳的稳定性是普遍的需求。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种碱性磷酸酶标记AMH抗体结合物及其制备方法，使所述结合物在37℃加速试验环境下稳定性更高；

本发明的另外一个发明目的在于提供上述碱性磷酸酶标记AMH抗体结合物在制备检测AMH试剂盒中的应用。

本发明的另外一个目的在于提供上述试剂盒的制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种碱性磷酸酶标记AMH抗体结合物，具备式I所示结构：

其中，R-NH为碱性磷酸酶，Antibody-NH为AMH抗体。

本发明还同时提供了式I所示碱性磷酸酶标记AMH抗体结合物的制备方法，包括：

步骤1、碱性磷酸酶与Traut’s Reagent室温反应生成改性的碱性磷酸酶；

步骤2、AMH抗体用Sulfo-SMCC在室温下活化，生成活化后的AMH抗体，然后与步骤1生成的改性的碱性磷酸酶反应，生成式I结构的碱性磷酸酶标记AMH抗体结合物；

作为优选，步骤1中所述碱性磷酸酶与Traut’s Reagent质量比(5-20)：1；在本发明具体实施方式中，所述碱性磷酸酶与Traut’s Reagent质量比10：1；

作为优选，步骤2中所述AMH抗体与Sulfo-SMCC质量比(5-20)：1；在本发明具体实施方式中，所述AMH抗体与Sulfo-SMCC质量比10：1。

本发明提供的酶标AMH抗体在37℃加速试验条件下放置10天后，基于化学发光免疫分析法进行检测，与未放置的对照相比发光值偏差控制在5％以内，相比现有专利有明显的优势。基于此，本发明提出了所述酶标AMH抗体在制备AMH检测试剂盒中的应用。作为优选，所述试剂盒为化学发光免疫分析法试剂盒。

依据应用，本发明提供了一种AMH化学发光免疫分析法试剂盒，其酶标抗体为本发明所述酶标AMH抗体。