[发明专利]一种UCST型非离子水溶性聚合物及其制备方法和应用

权利要求书

1. UCST型非离子水溶性聚合物在固定化LytA标签β-葡萄糖苷酶中的应用，所述聚合物的化学式为mPEG_x-b-P(AAM_y-co-AN_z)，其中b表示嵌段聚合方式，x表示聚乙二醇单甲醚的聚合度且x的范围为45~113，y、z分别为丙烯酰胺和丙烯腈在聚合物中的百分比。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，包括：

将UCST型非离子水溶性聚合物mPEG_x-b-P(AAM_y-co-AN_z)溶解于水中，加入戊二醛，搅拌反应、低温离心、去离子水洗涤，然后将沉淀和LytA标签β-葡萄糖苷酶溶于磷酸盐缓冲液，搅拌反应、低温离心、磷酸盐缓冲液洗涤，得到固定化LytA标签β-葡萄糖苷酶。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述UCST型非离子水溶性聚合物的结构式为：

。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述UCST型非离子水溶性聚合物通过改变丙烯酰胺和丙烯腈的投入量在0℃-100℃范围内调节聚合物UCST。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述UCST型非离子水溶性聚合物制备方法包括：

（1）苄基三硫代碳酸酯 BTPA的制备；

（2）利用苄基三硫代碳酸酯 BTPA制备mPEG_x大分子链转移剂；

（3）mPEG_x-b-P(AAM_y-co-AN_z) 的制备：

将丙烯酰胺AAM、丙烯腈AN、mPEG_x大分子链转移剂、偶氮二异丁腈和N，N-二甲基甲酰胺在搅拌条件下通入氮气，油浴反应，反应结束后冷却，接着加入过量甲醇，过滤，沉淀用去离子水透析，冷冻干燥，得到成品，即mPEG_x-b-P(AAM_y-co-AN_z)。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤（3）中，所述丙烯酰胺、丙烯腈、mPEG_x大分子链转移剂的摩尔比为26-30：1.89-25.09：0.04-0.06。

7. 根据权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤（3）中，所述丙烯酰胺、偶氮二异丁腈和N，N-二甲基甲酰胺的用量比为26-30 mmol：0.1-0.2mmol：20-25ml。

8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤（3）中，所述油浴反应的条件为：在70℃，250rpm下反应24h。

9.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，步骤（3）中，所述透析的时间为30h-48h。