[发明专利]一种基于拉曼光谱法测定维生素D3含量的方法

说明书

本发明属于功效成分分析技术领域，提供一种基于拉曼光谱法测定维生素D3含量的方法，该方法的步骤为：先配制不同维生素D3浓度的标准溶液，对上述标准溶液进行拉曼光谱扫描，根据标准溶液的维生素D3浓度及上述拉曼光谱图的峰面积(即拉曼光谱强度)，制得线性回归方程；再直接对含维生素D3的样品进行拉曼光谱扫描，根据上述线性回归方程和样品的拉曼光谱图的峰面积，确定上述样品中维生素D3的含量。该方法无需对样品进行繁琐的前处理，操作非常简单、易于掌握，省时省力，能快速、准确地检测维生素D3原料及含有维生素D3的制剂产品中的维生素D3含量；该方法仅需一台拉曼光谱仪即可完成检测，大大降低了检测成本，利于普及和推广。

技术领域

本发明涉及功效成分分析技术领域，特别是涉及一种基于拉曼光谱法测定维生素D3含量的方法。

背景技术

维生素D3能提高肌体对钙、磷的吸收。以维生素D3制成的营养品等产品，适用于治疗缺乏维生素D引起的儿童佝偻病，也适用于治疗成人缺钙导致的其他疾病，如骨质疏松。

目前，现有检测维生素D3以及含维生素D3产品的方法，大多为高效液相色谱法或液质联用法。该检测方法主要依据GB5009.82-2016第四法，采用正相-反相双系统检测，因此，需要两台高效液相色谱仪。该检测方法具有如下缺陷：1)需要对样品进行缩分、粉碎、皂化、提取、洗涤、浓缩、净化、洗脱、氮吹定容等前处理，步骤繁琐，操作时间长；2)在用正相-液相仪对样品进行净化的过程中，难以准确掌握维生素D3在管路的流出时间，容易造成维生素D3的损失，导致检测结果准确度差；3)该检测方法对实验室要求很高，需两台高效液相色谱仪、两根色谱柱，仪器的投入成本和维护成本非常高，导致检测成本居高不下，不利于普及。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种基于拉曼光谱法测定维生素D3含量的方法，该方法能快速、准确地检测维生素D3原料以及含有维生素D3的制剂产品中的维生素D3含量，且检测成本更低。

基于此，本发明公开了一种基于拉曼光谱法测定维生素D3含量的方法，包括如下步骤：

步骤一，配制不同维生素D3浓度的标准溶液；

步骤二，采用拉曼光谱仪对不同维生素D3浓度的所述标准溶液分别进行扫描，以获得所述标准溶液的拉曼光谱图，再确定所述标准溶液的拉曼光谱图的峰面积(也即拉曼光谱强度)；

步骤三，根据所述标准溶液的维生素D3浓度及其拉曼光谱图的峰面积，获得线性回归方程；

步骤四，称取定量的含维生素D3的样品，采用拉曼光谱仪对所述样品进行扫描，以获得所述样品的拉曼光谱图，再确定所述样品的拉曼光谱图的峰面积；

步骤五，根据所述线性回归方程和所述样品的拉曼光谱图的峰面积，确定所述样品中维生素D3的含量。

优选地，步骤一中，所述标准溶液中维生素D3的浓度分别为0.3％、0.5％、1％、2％、3％。

进一步优选地，步骤一中，所述标准溶液的配制方法为：分别称取不同重量的维生素D3标准品，分别加甲醇溶解，以制成维生素D3浓度分别为0.3％、0.5％、1％、2％、3％的标准溶液。

优选地，步骤三中，所述线性回归方程以所述标准溶液的维生素D3浓度为纵坐标，以其拉曼光谱图的峰面积为横坐标。

进一步优选地，步骤三中，所述线性回归方程为：y＝0.018x-0.013。

优选地，步骤四中，当含维生素D3的所述样品为粉末时，所述粉末的取样重量为20～30mg。

优选地，步骤四中，当含维生素D3的所述样品为软胶囊时，所述软胶囊的内容物的取样重量为240mg～260mg。