[发明专利]一种抗菌肽TgHbpe及其突变体

说明书

本发明公开了一种抗菌肽TgHbpe及其突变体。本发明从泥蚶血红蛋白亚基中分离出一段具有抗菌特性的抗菌肽TgHbpe，并对其进行定点突变，获得突变体抗菌肽mTgHbpe。通过功能分析和鉴定，发现这两种抗菌肽对大肠杆菌和溶藻弧菌均具有较强的杀菌效果，且经突变筛选的mTgHbpe抗菌活力要明显强于TgHbpe；抗菌肽TgHbpe对大肠杆菌的MIC约为120μM，对溶藻弧菌的MIC约为100μM；抗菌肽mTgHbpe对大肠杆菌的MIC约为20μM，对溶藻弧菌的MIC约为7μM。这为泥蚶血红蛋白源抗菌肽的开发利用奠定了基础。

技术领域

本发明属于应用海洋生物技术领域，具体涉及一种抗菌肽TgHbpe及其突变体。

背景技术

贝类是我国海水养殖的重要对象，是海水养殖的重要组成部分，对我国的经济有着极其重要的推动作用。随着人们对贝类需求的不断增加，贝类养殖得到了迅猛的发展。泥蚶(Tegillarca granosa)，属软体动物门，双壳纲，列齿目，蚶科，蚶属，是中国传统的养殖贝类。泥蚶肉质鲜美，壳可入药，有消血块和化痰积的功效。因为其实惠的价格，被众多沿海城市的人们所喜爱。

血红蛋白(hemoglobin，Hb)是红细胞内运输氧的特殊蛋白质，是使血液呈红色的蛋白，所有脊椎动物和部分无脊椎动物血液中都含有这一类呼吸蛋白。血红蛋白由珠蛋白和血红素组成，具有多重生物学功能，是最具有研究价值的蛋白质家族之一。绝大多数无脊椎动物，其携氧蛋白是血蓝蛋白。而泥蚶作为一种无脊椎动物，其携氧蛋白是血红蛋白。除了运输氧气的功能外，血蓝蛋白和血红蛋白还有抗菌、抗病毒等功能。有相关研究表明，泥蚶的血红蛋白对于一些细菌具有明显的抗菌作用。

抗菌肽(Antimicrobial peptides，AMPs)又称为抗微生物肽或者宿主防御肽，是生物体经诱导产生的具有广谱抗菌活性和免疫调节活性的一类小分子多肽，属于机体非特异性防御系统的固有组成部分。随着科学技术的进步，生物信息学技术已被广泛应用于科学研究中，可以通过一系列的在线软件对抗菌肽进行预测和筛选，大大缩短了研究的时间，提高了效率。目前所发现的海洋生物抗菌肽绝大多数都来源于海洋无脊椎动物，包括环节动物、软体动物、棘皮动物、甲壳动物、鱼类等。大部分海洋生物抗菌肽无需外界刺激，可以直接表达，即组成型表达。其中，软体动物是抗菌肽研究最多的类群之一。在过去的20年中，对海洋生物抗菌肽的研究已经取得了足够多的进展，但相对于陆生动物而言，其广度和深度仍然不足。与传统抗生素相比，抗菌肽的主要作用在细菌的细胞膜上，通过改变细胞膜的通透性而杀灭细菌，使用后在人体内几乎无残留，不易产生抗药性，属于机体非特异性免疫活动的一部分，长期添加可激发提高机体免疫力，增强抗病力。而长期使用抗生素的话，会使生物体产生抗药性，会产生超级细菌，且对人体损害较大，会直接破坏机体免疫系统，降低机体抵御病害的能力。因此，对抗菌肽的研究具有重要意义。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的泥蚶血红蛋白源抗菌肽TgHbpe及其突变体mTgHbpe。

本发明的一种抗菌肽TgHbpe，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

本发明还提供所述的抗菌肽TgHbpe在制备抗菌药物中的应用。

优选，所述的抗菌药物，是抗溶藻弧菌和大肠杆菌的药物。

本发明还提供了所述的抗菌肽TgHbpe的突变体，即抗菌肽mTgHbpe，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明还提供所述的抗菌肽mTgHbpe在制备抗菌药物中的应用。

优选，所述的抗菌药物，是抗溶藻弧菌和大肠杆菌的药物。