[发明专利]一种氟苯尼考的快速检测方法

说明书

本发明公开了一种氟苯尼考的快速检测方法，一种氟苯尼考的快速检测方法，包括以下步骤：步骤一：预处理，对样品进行清洗和有机溶剂的提取；步骤二：将有机溶剂的提取液中加入5毫升乙腈乙酸乙酯，充分振荡30秒左右，通过涡旋震荡仪振荡，再加入10毫升乙酸乙酯，涡漩混匀2分钟，5000r/min离心5分钟。该种氟苯尼考的快速检测方法，在样品前处理过程中通过乙酸乙酯洗涤水解产物去除了大量的脂肪和其他内源性干扰物；显著提高了检测方法对猪可食性组织中其他物质的抗干扰能力，同时降低了检测成本，减少了有机溶剂的用量，定量分析结果可靠，适用于基层检测单位对猪可食性组织中的氟苯尼考总残留物进行日常监控采用内标法定量。

技术领域

本发明涉及氟苯尼考检测技术领域，具体为一种氟苯尼考的快速检测方法。

背景技术

氟苯尼考又名氟甲砜霉素，是氯霉素的氟化衍生物，其分子结构中无潜在致再生障碍性贫血的硝基，且抗菌谱广、易吸收。因此，氟苯尼考已成为氯霉素的主要替代药品，广泛用于动物体内革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和氯霉素耐药性细菌的治疗。然而，繁殖毒性试验结果表明，氟苯尼考具有血液毒性、胚胎毒性以及免疫抑制作用，用药后还会出现厌食、腹泻等不良反应，大量食用氟苯尼考超标的猪肉会对人体健康带来极大的危害。目前，由于兽药临床上使用不当，细菌对氟苯尼考的耐药性也越来越强，且随着时间的推移呈现多重耐药性。长期下去，细菌的耐药性将会得到极大的提高，普通的药物将对细菌无有效抑制作用。这不仅造成经济上的浪费，还会增大兽医临床治病难度，甚至威胁到人类的生命安全。

药物残留监测通常检测活体动物的尿液或血液样本，或者检测宰杀后动物的组织样本，如肌肉、肝脏等。由于兽药残留检测的时滞性，同时兽药在生物组织中受到酶类等生物大分子的作用，通常易于代谢而具有较高的清除率，因此有时追溯一些非正常的或非法使用的兽药则变得困难。建立快速灵敏的检测方法和寻找可活体取样的检材一直是兽药残留分析研究的两个重要方向。在过去的十几年间，人们从法医学检测人体头发中兴奋剂等违禁药物得到启发，探讨并研究了动物毛发作为检材的可行性。由于动物毛发易采集、运输，保存，更重要的是可以在宰前做出安全性评价的特点，毛发中缺少血液循环，缺少降解药物的各种活性物质和快速的排泄途径，使得药物代谢缓慢而可在毛发中的保留时间远远长于其他组织。与一般的组织样品(肌肉、肝脏、肾脏、脂肪和肺脏等)相比，毛发不需要将动物屠宰就可获得，较之前者简单、方便。另外，由于毛发的结构和成分特点以及较低的代谢活性，决定了药物进入毛发后在其中保留时间久，可作为长期检测样本，这是尿液或血液无法比拟的，尤其对于半衰期较短的药物，如氟苯尼考等，在经过一定时间的休药期后，从食用组织或血、尿中已无法检出药物残留证明是否使用过此禁用药物，而毛发因药物在其中代谢缓慢，在较长一段时间内仍可作为检测样本，提供违禁药物使用证明依据。检测猪毛发中是否含有抗病毒类药物残留，从而达到从养殖源头控制禁用药物使用的目的，氟苯尼考目前一般采用HPLC或LC/MS，但这类方法样本前处理及测定操作烦琐，检测所需时间较长，检测费用高，推广使用受到限制，因此，研究建立猪毛发中氟苯尼考药物残留的检测方法，对于有效监控该类药物的使用、保障我国动物性食品安全具有重要的意义。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了如下的技术方案：

本发明一种氟苯尼考的快速检测方法，包括以下步骤：

步骤一：预处理，对样品进行清洗和有机溶剂的提取；

步骤二：将有机溶剂的提取液中加入5毫升乙腈乙酸乙酯，充分振荡30秒左右，通过涡旋震荡仪振荡，再加入10毫升乙酸乙酯，涡漩混匀2分钟，5000r/min离心5分钟；

步骤三：清液在60℃的温度下，通过氮气吹干，在添加1毫升的水溶解残渣，并且涡旋30秒，后通过滤膜过滤，即得到待检测液；

步骤四：抽取待检测液上层100μL待检测液，插入检测条，读取检测结果。

作为本发明的一种优选技术方案，所述步骤一中预处理包括以下步骤：